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來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-01-11

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Westem HRP基材。高背景分鎖不足更改為不同的阻止解決方案。吸筆架不夠濕組裝前,先將吸墨紙架弄濕。阻塞解決方案可能有始終準(zhǔn)備新鮮的0.5%脫脂/低脂干奶。降級(jí)的抗體濃度過高降低抗體的濃度。吸筆架朝上放置將印跡架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗滌不足進(jìn)行至少4次每次30 mL的洗滌。添加清洗劑時(shí),確保真空連續(xù)運(yùn)行緩沖。整個(gè)系統(tǒng)電平不一致的信號(hào)確保系統(tǒng)在平坦的水平表面上。污點(diǎn)抗體不均勻補(bǔ)充封閉液和抗體稀釋劑遍及整個(gè)表面0.1%Tween 20表面活性劑。吸墨紙架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整個(gè)印跡中的抗體。應(yīng)用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印跡)抗體。抗體體積低沒有抗體回收盤確保抗體中的孔,回收托盤algn

關(guān)閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運(yùn)行連續(xù)添加30 mL洗滌緩沖液(對(duì)于MultiBlot為15 mL)。重復(fù)洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關(guān)閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點(diǎn)固定器中取出污點(diǎn),并與適當(dāng)?shù)臋z測(cè)試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴(kuò)展一級(jí)抗體孵育:一小時(shí)至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對(duì)于MultiBlot),5 mL(對(duì)于Mini blot)或10 mL(對(duì)于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座益啟生物提供專業(yè)的細(xì)胞計(jì)數(shù)器。

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用SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng) 系統(tǒng)設(shè)置 1.將SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作臺(tái)上。2.通過推動(dòng)管道末端的聯(lián)接插件,將真空管道連接至系統(tǒng)背面。插入系統(tǒng)基座背面的快速斷開接頭,直至其滑動(dòng)。注意:要斷開管路連接,請(qǐng)用食指將管路連接器下方的卡舌向上推,然后將其拉出。管出來。3.將管道的另一端連接到真空源。使用一升的真空燒瓶作為疏水閥和一個(gè)Millex-FA。過濾器(目錄號(hào)SLFA05010)可保護(hù)真空源不受污染,如下所示。注意:任何可以產(chǎn)生410毫巴(12 inHg)和34 L / min的真空源就足夠了。如果是真空如果源的工作溫度高于410毫巴,則SNAP i.d.2.0系統(tǒng)將自動(dòng)調(diào)節(jié)真空度壓力。如果真空源不足,則流經(jīng)系統(tǒng)的流量可能會(huì)不一致,從而導(dǎo)致更長(zhǎng)的時(shí)間。處理時(shí)間和/或抗虹口區(qū)Merck細(xì)胞計(jì)數(shù)器Merck儀器報(bào)價(jià)

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