離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發生反應而產生溶出污染。關于默克密理博各種微濾、超濾產品的化學相容性請參考產品使用說明書或垂詢技術支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質,但膜的很多特性會對這一目的產生影響。影響回收的因素包括:? 標稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量超濾濃縮管的系列有很多。楊浦區離心濃縮管訂購
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準,相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費,不亦樂乎?江蘇濃縮管聯系人超濾濃縮管應用領域你知道嗎。
脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時進行濃縮。 6. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進行較大體積操作時,可以適當延長離心時間,也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細信息。
將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內加入預先準備好的1.5 mL含有染料的反應混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優化選做:將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時濃縮。 8. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標記好的抗體。 特點與優點: 特別的反轉離心回收設計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設計的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 根據您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設計。
Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮(3kDa 細胞色素 C, 10kDa 細胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG), 測定在離心一定時間后的回收率。數據顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產品,默克密理博生命科學部網 站上提供選擇指引,您需要按照提 示進行選擇,**終會選出一款產品。 為每次實驗選擇**合適的, 您也能快速成為超濾高手!上海超濾濃縮管代理銷售哪家比較好?楊浦區離心濃縮管訂購
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蛋白復性,溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理,采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管,**提高了樣品透析表面積,在2-5小時內即可完成透析,是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優點: 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質,增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染,安全可靠 旋蓋式設計,易于打開和關緊 硬管設計,易于更充分地吸取、移走樣品,即使是μL級樣品加樣方便,功能多樣 ? 采用標準***頭加樣,而非注射器和針頭加樣,減少膜破損的風險提供的浮漂適合在常見的廣口燒杯中使用,方便在透析過程中換液D-Tube? 透析管還可以用于從瓊脂糖或丙烯酰凝膠電洗脫樣品楊浦區離心濃縮管訂購
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