●原因：①組織脫水，透明不夠。②浸蠟時間過長、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時間不夠，或組織中含有乙醇等，石蠟不易滲入組織中故導致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時間過久。●解決方法：①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時間。②依組織的性質和結構特點確定浸蠟時間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補救。③脫水，透明滲蠟不夠，應重新熔化，退回入二甲苯和酒精，再進行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因：①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟，刀口不干凈。③組織浸蠟時間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利。●解決方法：①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時一邊切片一邊用冰塊冰凍或換蠟。如室溫過高，可開空調降低室溫。②切片刀不干凈，可用棉花沾少許二甲苯將刀口拭干凈。③組織浸蠟不夠，可重復浸蠟過程。④將切片刀磨銳利再行切片。南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。南京實驗醫學平臺一站式病理實驗外包檢測平臺。專門做病理實驗外包

病理實驗外包，病理染色HE染色常見問題：Q3：細胞核染色過淺，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過短，或蘇木素過度氧化失效，或分化時間太長。對策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液，每個3-5min即可，接著重新染色。可以適當地組織的嗜堿性以增強核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來水沖洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h，自來水沖洗10min染色。Q4：細胞核染色過深，胞漿著藍色答：切片在蘇木素染液中停留過長；或切片太厚；或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。安徽病理實驗外包檢測病理實驗外包檢測服務介紹，醫學造模以及評價。

病理實驗外包，病理染色熒光原位雜交技術詳細介紹1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的，二者經變性-退火-復性，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛，可利用該報告分子與熒光素標記的特異親和素之間的**化學反應，經熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。2、實驗流程FISH樣本的制備→探針的制備→探針標記→雜交→（染色體顯帶）→熒光顯微鏡檢測→結果分析。3、特點原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高，可以通過延長曝光時間加強信號強度，故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。

病理實驗外包，病理染色骨組織的處理方式：組織里存有鈣鹽可妨礙用常規方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶，經過固定后，需要先將鈣鹽除去使組織軟化，才能進行常規切片。如果脫鈣不全，則切片容易撕開或碎裂，損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程，稱為脫鈣。骨組織固定24小時后，鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間，但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中，每日更換新鮮液，直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進行常規脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。南京英瀚斯-病理實驗外包檢測-專業第三方檢測機構。

病理實驗外包，病理染色常見染色介紹VonKossa染色：簡介：鈣結節的形成為成骨細胞特有，Vonkossa染色法是染色礦化結節的經典方法，利用硝酸銀與鈣鹽的復分解反應形成可被還原的銀鹽，在強光或紫外光下或者強還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。簡要流程：石蠟切片/細胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→硝酸銀滴染→蘇木素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片（中性樹膠）→Vonkossa染**（鈣鹽沉積區域呈黑色或棕黑色，細胞核呈藍色，背景呈紅色；或者鈣鹽沉積區域呈黑色或棕黑色，背景呈紅色）。VonKossa染色利用金屬離子置換反應檢測組織中鈣鹽沉積，由硝酸銀溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。該染色可用于血管鈣化的檢測南京病理實驗外包檢測，優先南京英瀚斯。山東比較好的病理實驗外包檢測

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病理實驗外包，病理染色切片常見問題及解決方法：1.切片粘在切片刀不易取下●原因：切片時有靜電作用，產生靜電吸引，在冬季或氣候干燥時常出現這種情況。●解決方法：可用加濕器。以增加空氣中的水分，而減少靜電作用。2.切片厚薄不均●原因：①切片微動部分失靈，齒輪跳格。②蠟塊太大，過硬，轉動時刀刃受震動。●解決方法：①修理切片機失靈的部分，調整螺旋。加機油潤滑零件，必要時需請專業技術人員調整切片機。②如蠟塊過大，以后取材時注意取材的大小。蠟塊組織過硬，可返回水中浸泡，再重新脫水和包埋。專門做病理實驗外包