在當代準確醫療的大趨勢下,外泌體的發現和研究為肺病的早期診斷和醫治提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發現和早期診療提供可靠依據。根據種瘤來源的外泌體在肺病的發發展和侵襲轉移過程中的作用及相關機制的研究,臨床醫療人員可以針對不同的患者制定合適的醫治方案,以達到改善肺病患者生存率,延長肺病患者生存時間的目的。但是,針對外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,如:外泌體的純化及標記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機制及信號通路等??偠灾?,外泌體的研究有著廣闊的前景,基于外泌體與肺病的研究,有望研發出能夠應用于肺病臨床診斷和醫治的有效措施,造福更多的患者。目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。外泌體鑒定金標準
通過對28例前列腺ai癥患者和19例正常人尿液外泌體中的miRNA進行深度測序分析,發現兩種miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者組明顯下調,表明尿液外泌體中的特異性miRNA可能作為前列腺ai的新型生物標志物。Khurana等[100]將研究對象由miRNAs擴大至多種類型RNA,通過對慢性腎病患者尿液外泌體中各類RNA進行系統研究,在慢性腎病患者組中識別出30種明顯差異的lncRNAs,表明尿液外泌體中的lncRNAs具有作為慢性腎病早期診斷標志物的潛力。Skotland等的研究則表明尿液外泌體中的脂質能夠作為前列腺ai的新型標志物,3種脂質標志物結合使用能夠有效提高對前列腺ai的診斷靈敏度(93%)和特異性(100%)。外泌體載藥外泌體可以作為藥物治理的遞送系統。
密度梯度離心是基于差速超高速離心的改良技術。該方法需預先利用常用的梯度液介質如蔗糖、碘克沙醇和氯化銫等,在離心管中構筑從底部到頂部密度逐漸降低的密度梯度帶。根據密度梯度構建和沉降方式的不同,又可以分為速率區帶離心法和等密度梯度離心法,前者主要根據顆粒的沉降速率分離,介質密度均小于外泌體密度,離心時樣品在向超速離心管底部移動時,會通過密度不斷增加的密度梯度區帶,密度大的顆粒更容易穿過密度更高的梯度層,更快地到達管底,因此控制離心的時間很重要;等密度梯度離心法中的密度梯度區帶,則會根據樣品液中各種溶質成分來進行組合,離心過程中,無論離心時間多久,不同密度顆粒jin會富集到具有相同密度的梯度區帶,而不會沉淀到底部。
由于這些胞外囊泡(EV)與生理和病理狀況之間的關系,人們對EV的興趣呈指數增長。EVs對新型診斷和臨床轉化有很大希望。近的研究已經將這些交流所需的一些任務歸結為細胞外囊泡(如外泌體和微泡),主要參與髓鞘膠質細胞和神經元之間的相互信號傳遞從而促進神經元存活、由小膠質細胞介導的免疫應答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認為是神經變性疾病和腦病擴散的重要因素。這些細胞外囊泡功能為以前無法識別的神經系統內跨細胞相互作用增加了新方式。實際上,用PS親和法提取的人白血病細胞釋放的外泌體。
外泌體作為疾病診斷標志物的潛在應用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統的技術突破,要將其用于臨床治理,外泌體的大規模工業化生產面臨很大的挑戰。外泌體(exosome)是細胞分泌囊泡(extracellularvesicles)的一種亞型,存在于生物體液中,并參與多種生理和病理過程。外泌體被認為是細胞間通信的一種新機制,允許細胞交換蛋白質、脂質和遺傳物質。過去,細胞分泌的外泌體一度被認為只是參與廢物排泄;現在,隨著高通量蛋白質組學和基因組學的發展,外泌體被寬泛認為是生物體內細胞間短距離和長距離交流的高度保守的途徑,這種細胞間通信對于正常細胞和瘤細胞都是非常重要的。外泌體并作為癥狀早期診斷技術,應用于與癥狀進展相關的研究。福建外泌體miRNA測序
外泌體可以直接進入受體細胞影響細胞功能。外泌體鑒定金標準
由于卵巢中流細胞質膜上的磷脂酰絲氨酸(phosphati[1]dylserine,PS)可以外泌體形式分泌入血,惡性卵巢ai患者血漿外泌體中的PS水平明顯高于卵巢良xing病變患者和健康對照者,因此外泌體中的PS可用于協助早期卵巢惡性中流的篩查和診斷。外泌體可穿透血-腦脊液屏障的特點也為腦中流患者提供了早期診斷的重要工具。血漿微囊泡EGFRvIIImRNA已被證明可作為膠質母細胞瘤患者診斷的支持證據。2020年,DavidLyden和WilliamR.Jarnagin教授團隊合作,通過探究來自不同ai種組織、血漿和其他體液的426個人類樣品中細胞外囊泡和顆粒(extracellularvesicleandparticle,EVP)的蛋白質組學特征,鑒定出一批中流特異性血漿EVP蛋白(特異度和靈敏度分別為95%和90%),并可區分患者的中流類型,使基于外泌體的中流診斷和鑒別診斷向前邁進了一步。外泌體鑒定金標準