芯棄疾JX-8B數字ELISA產品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

我們已經開發(fā)了兩種臨床相關蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原（PSA）和腫瘤壞死因子α（TNF-α），以確定高酶標記物單體提供的靈敏度轉化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質。兩種蛋白質的數字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗的關鍵參數是：珠子濃度和兩種標記試劑（檢測試劑和酶偶聯物）的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先，足夠的珠子必須在場以從熱力學和動力學中捕獲大部分目標分析物從熱力學角度看，100μL中有20萬個珠子，每個珠子大約有8萬個與之結合的抗體25相當于約0.3nM的抗體濃度，在該濃度下，抗體-蛋白平衡導致高捕獲效率（>70%）(D.M.R.，E.P.F.，D.C.D.，未發(fā)表工作）。 芯棄疾JX-8B數字ELISA，微量檢測，使用微量樣本就能測試；芯棄疾單分子數字ELISA檢測平臺開發(fā)

    芯棄疾JX-8B數字ELISA產品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個酶產生的熒光團限制在極小范圍內，從而能夠檢測到非常低濃度的酶標記物體積（~50fL），導致熒光產物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實現這種定位，在第二步中，將珠子加載到一個陣列為離散的微升大小的孔（圖1C）。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個孔，孔徑為μm，孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下，用橡膠密封圈密封。Rissin等人，第3頁將每個微球隔離在飛升反應室中。具有單一酶的微球標記的免疫復合物在50飛升的反應室中產生局部高濃度的熒光產物（圖1D）。通過使用標準顯微鏡光學系統(tǒng)獲取陣列的時間變化熒光圖像，可以區(qū)分與單一酶分子相關的微球（“開啟”孔）和不與酶相關的微球（“關閉”孔）；補充圖1顯示了“開啟”和“關閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個免疫復合物同時檢測。通過測定供試品中的蛋白質濃度來確定計算含有珠子和熒光產物的孔數相對于含有珠子的孔數（圖1D）。使用SiMoA，濃度是因此，我們稱SiMoA應用于檢測單個免疫復合物為數字ELISA。 進口數字ELISA極速檢測芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產品，每個醫(yī)學實驗室都能用的單分子檢測；

 芯棄疾JX-8B單分子ELISA高敏檢測產品具有開放的優(yōu)勢：

開放：可匹配各種免疫檢測項目，兼容各種自行開發(fā)的試劑；

測試結果：國產普通熒光顯微鏡,科研或預研場景；

測試結果：國產低成本熒光顯微鏡拍攝

我們公司擁有專業(yè)的MEMS、微流控設計/加工能力。提供一站式單步工藝或完整器件的設計流片。我們提供的服務有：MEMS微納加工，微流控芯片加工、設計，高靈敏免疫檢測產品芯棄疾JX-8B單分子ELISA、單分子檢測芯片、數字免疫層析POCT檢測產品、滴液生成微球制備芯片等。

芯棄疾JX-8B數字ELISA，我們?yōu)槭裁茨茏龅剑慨a品主要原理同單分子陣列技術：

非常近，已經描述了兩種數字蛋白質測量方法，這些方法能夠提高對單分子水平的靈敏度。一種方法依賴于在固相上形成免疫三明治復合物，然后化學解離并通過激光計數每個分子。第二種方法由美國開發(fā)，依賴于單分子陣列和同時計數單分子捕獲微珠。這兩種方法都能將檢測能力的下限降低10倍或更多，與增強的模擬放大方法相比，但后者技術也易于與高通量自動化儀器兼容，用于ELISA試劑處理。通過使用大量微孔陣列，可以同時獲取和查詢數百到數萬個數據點，實現快速數據采集和穩(wěn)健統(tǒng)計。此外，從陣列中可能獲得的快速數據采集可以應用于預編碼具有不同熒光特性的多個微珠亞群，從而在單分子水平上實現高通量多重分析。 芯棄疾單分子ELISA檢測試劑盒，多重超敏檢測，多重指標也能檢測到亞皮克級！

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由于活性珠子的百分比接近50%（酶與微球的比例大于~1：1.5)，然而，使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性，我們達到了數字動態(tài)范圍的實際上限。例如，圖2中7fM(~45%活性）的信號偏離了線性。因此，這里使用50,000個孔展示的數字線性動態(tài)范圍是從3.5fM到350zM，即大約四個對數單位。前提是蛋白質使用適當的酶濃度進行標記，這種動態(tài)范圍對于許多臨床應用來說是足夠的 單分子POCT產品，幫您數字化高靈敏檢測，且微量樣本多重指標檢測；生物實驗室數字ELISA檢測平臺開發(fā)

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數字ELISA測量蛋白質濃度遠低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應：1）SiMoA對酶標記的高度敏感性；以及2）通過數字化蛋白質檢測可以實現的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術到標簽，抗體親和力，試驗背景，以及背景測量值的變異（%CV）27.SiMoA對酶非常敏感標簽（圖2）為在數字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標記蛋白提供了基礎。也就是說，對于給定親和力的抗體，其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定，SiMoA的高標記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明，數字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結合（NSB）與捕獲珠表面結合（補充表2）。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標記靈敏度，明顯減少了檢測抗體（~1nM)和酶標記物（1–50pM)的需要，以檢測結合事件，與傳統(tǒng)方法相比（標記試劑濃度~10nM)。降低的標記物濃度減少了NSB到捕獲表面，從而導致背景信號明顯降低。 芯棄疾單分子數字ELISA檢測平臺開發(fā)