參考原理:血液中單個蛋白質分子的檢測有助于識別許多新的診斷性蛋白質標記物。我們報告了一種同時檢測數百至數千個單獨蛋白質分子的方法,該方法能夠檢測到非常低濃度的蛋白質。蛋白質被捕獲在顯微珠上,并用酶標記,每個顯微珠上有一個或零個酶標記的蛋白質。通過將這些顯微珠分離成50飛米的陣列反應室,單個蛋白質可以通過熒光想象檢測到。通過單化這些陣列中的分子,~10-20種酶可以在100μL(~10?19M)中檢測到。單個基于酶標記的分子酶聯免疫吸附試驗(數字ELISA)能夠檢測血清中臨床相關的蛋白質,其濃度(<10?15M)遠低于傳統ELISA3-5。數字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除術的患者血清中檢測到前列腺特異性抗原,比較低至14fmol/mL(0.4fmol)。
數字化高敏ELISA芯片,可以進行8孔、4孔的靈活檢測。單分子蛋白數字ELISA極速
創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA
我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景:適合生物實驗室、醫學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。
將200,000個功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時后,移除DNA靶標溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標DNA具有特異性,孵育1小時。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 單分子蛋白數字ELISA極速芯棄疾JX-8B數字ELISA,極速檢測,檢測用時只需要 15-30min!
芯棄疾JX-8B數字ELISA產品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學和抑制作用。我們的目標是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標記的單個蛋白質分子。在這個單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個三明治抗體復合物,結合的復合物用酶標記,如同常規的基于微球的ELISA。當測定含有極低濃度蛋白質的樣品,蛋白質的比值分子(以及由此產生的酶標記復合物)與微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有標記免疫復合物的微球百分比遵循泊松分布,導致單個微球上存在單一免疫復合物。例如,如果在(3000個分子)的蛋白質中捕獲并標記了50μM的蛋白質,并且在200,000個微球上進行標記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數量的酶使用標準檢測技術(例如,平板閱讀器)的標簽,因為熒光染料由每種酶生成的產物擴散到一個大卵試驗體積(通常為),并進入其中需要數十萬種酶標簽才能產生高于該水平的熒光信號背景。
芯棄疾JX-8B數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品為什么能做到?
先進新型的單分子檢測方法的普及版;每個生物/醫學實驗室都用得起的單分子免疫檢測;使用現有平臺就能做的單分子免疫檢測且具有以下特點:多重、超敏微量、極速靈活、開放;
我們的芯棄疾.單分子ELISA產品:同樣的單分子技術方案,但創新性芯片方案,主要過程均芯片上完成,只有需搭配簡單小型實驗室設備,或實驗室常見已有設備;實現單分子檢測方案的小型化、靈活使用、低成本。更符合國內實驗室的各種科研使用場景 每個生物/醫學實驗室都用得起的單分子免疫檢測;
POCT芯片的即時診斷革新:芯棄疾POCT芯片采用卡片式設計(尺寸8×5cm),集成8個檢測通道,搭配全自動加樣儀(加樣精度±0.1μL)與便攜式熒光掃描儀(分辨率5μm),實現“樣本進-結果出”的15分鐘極速檢測。其**性能媲美化學發光,如超敏肌鈣蛋白T(hs-cTnT)檢測限達10pg/mL(線性范圍0-1000pg/mL),可在急診科快速鑒別心肌梗死(閾值>14pg/mL)。在膿毒癥管理中,PCT與IL-6聯合檢測靈敏度達95%,較單一指標提升20%。芯片操作全程自動化,醫護人員*需加載樣本即可完成檢測,無需復雜培訓。在基層醫療場景中,該技術已應用于核酸快檢(靈敏度98%)、流感分型(A/B型同步檢測)及糖尿病酮癥酸中毒(β-羥丁酸檢測)等場景,檢測時間從2小時縮短至15分鐘,誤診率降低至5%以下。自動版芯片操作簡便穩定,2-4μl 微量樣本可測多項指標,滿足高通量檢測需求。創新性數字ELISA檢測通量
芯棄疾JX-8B數字ELISA,微量檢測,使用微量樣本就能測試;單分子蛋白數字ELISA極速
全自動加樣與圖像分析系統:智能化檢測的關鍵環節,全自動加樣儀與圖像分析軟件構成數字ELISA芯片的智能化**,實現從樣本處理到結果輸出的全流程自動化。加樣儀的8通道設計確保精細定量加樣,避免人工操作誤差,加樣精度達±1%;圖像分析軟件通過熒光信號識別與四參數Logistic曲線擬合,自動計算濃度值,相關系數r2≥0.999,結果可靠性高。在自動版芯片檢測中,系統可實時監控磁珠捕獲效率,自動剔除異常數據點,確保CV值<5%。該智能化體系不僅提升檢測效率,更降低了對操作人員的技術依賴,適用于基層醫療單位與高通量檢測場景,推動免疫檢測從人工操作向自動化、標準化轉型。單分子蛋白數字ELISA極速