美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經被FDA和國內外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數板在大鼠附睪精子計數結果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養液進行一定倍數的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數,同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數板內,通過光學顯微鏡進行計數,比較兩種計數方法的差異性。結果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數板的精子計數結果無統計學差異(P>0.05)。結論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。CASA系統操作簡便，檢測速度快，且重復性優于人工檢測。香港全自動化精子分析WOB

醫生處置質量是指診斷質量?是以當今醫學科學知識、技術為基礎依據癥狀來完成的。CASA系統可以為醫生提供優于傳統精子分析的手段和快速準確的分析結果［5］。CASA在醫生處置質量方面的特點在于：①當CASA系統的參數設定和樣品的處理方式（溫度、稀釋法、緩沖液）確定時?通過個體內和個體間的比較?CASA的精子活力重復性明顯好于直觀評估［6］。②實驗室數據資料是質量的一部分?CASA系統所有數據都是直接在線獲得的?因此明顯優于其他方法［6］?記錄傳遞到數據庫的過程無錯誤發生?可清楚準確地打印出結果。所有的數據可直接轉換到數據庫、能夠對***前和***后測定的數據進行統計學比較［9］、質量控制數據的采集與保存、每天的標本測試記錄以及許多其他報告等等?如此大量數據的處理只有在計算機中才能完成。但是CASA系統的參數設定也許限制了其質量?特別是在精子形態學檢查中?通過CASA系統對精子形態學特征進行分析［7］?這些特征（細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇?這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結果一致性較差［8］。就形態學分析而言?傳統方法的可變性遠遠大于CASA分析。馬精子分析ALHWHO第6版明確提出：使用CASA系統須遵循適當的程序步驟，才能獲得可靠和可重復的結果。

方法:使用兩種已知濃度的質控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數精液的結果。結果:計數乳膠珠時,CellVU計數池的結果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數池和Makler計數池結果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統結果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數精液時,CellVU計數池與CASA系統結果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數池和Makler計數池結果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數池、CASA系統與血細胞計數池、Makler計數池結果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結論:計數精液時,CASA系統與CellVU計數結果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數方法。

精子分析儀使用注意事項1.樣品制備是CASA取得高質量檢查結果的關鍵。CASA采用深度為10um樣品池，能保證精子在單層界面內自由運動。取樣分析前標本必須充分混勻，用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中，用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計數池可影響精子的活力，尤其影響灰度CASA精子計數的準確性。3.精子樣品密度過大時，造成圖像處理上的粘連，無法分析每個精子的運動特性。**中所含精子太少時，需增加檢查視野數量或者使用低倍物鏡觀察，以提高樣品檢出率。Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優點。

測定精子密度和精子總數的方法主要包括顯微鏡計數和全自動分析。1.顯微鏡計數：這是傳統的測定方法，需要收集精液，通常是使用量杯。收集后，應在實驗室中盡快進行計數。應在光學顯微鏡下將精子進行分類，這一步非常重要，因為完整的精子才能被計數。然后，將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉，通過顯微鏡觀察并計數。這種方法需要一定的經驗和技巧，而且受到許多因素的影響，如精子的活動性、濃度、形態等。2.全自動分析：隨著科技的發展，現在有全自動的精子分析儀，可以快速準確地測定精子密度和總數。這種方法通過激光技術進行，可以測量大量精子，包括前向運動的精子。這些儀器通常可以提供更精確的結果，并且減少了人為錯誤。在進行精子計數前，男性應避免長時間禁欲，因為這可能會影響精子的數量和質量。同時，健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數量和質量。精子分析，直線速率（VSL）?：精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率。南京兔子精子分析STR

精子分析，平均角位移（MAD）?：精子頭沿其曲線軌跡瞬時轉折角度的時均J對值?。香港全自動化精子分析WOB

精子計數是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數量將精子計數值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細胞計數板上，在顯微鏡下計數紅細胞計數區內的所有精子數并換算為每m1內所含精子數。此外還可用電子細胞計數儀經調整閾值設置后計數精子數量。將已經液化的精液標本均勻混合，用白細胞計數吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計數板內，計數二大格（每格面積1平方毫米）之精子數，在尾數后加5個“0”即得每毫升精液內精子數。例如計數為1280個，則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內，稀釋后進行計數。如精子的數目極少，亦可改為稀釋10倍計數。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計數來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計數來反映睪丸的生精機能。香港全自動化精子分析WOB