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什么是外泌體？外泌體的作用。簡單來說，它就是我們皮膚肌底細胞的分泌物，但是這個分泌物是除了細胞核外，把其他所有的營養物質都能涵蓋，所以它是取之于人類細胞用之于人類細胞，成分安全。外泌體不是干細胞，是干細胞較精華的部分，生物**為了獲取外泌體囊泡，將臍帶間充質干細胞進行分離、純化、培養、增殖等一系列復雜先進工藝制備而成的外泌體混懸液，他是干細胞得以存活的精華，細胞是靠它生長的，**對干細胞的獲取很容易的，但外泌體就比較難了，全球醫學**都在為研究外泌體的醫學應用而付出努力，目前只有少數國家的細胞庫能夠成功獲取這一成果，其含有許多信號蛋白，核糖核酸，細胞生命DNA的密碼，一個細胞里95%是水，還有...

外泌體的表征分析：動態光散射：使用Anton-PaarLightsizer500粒子分析儀測定外泌體制劑中的粒度分布。動態光散射測量由于溶液中粒子的布朗運動引起的散射光強度的動態波動，（685nm的激光，檢測角度為15、90、175度）；較小的粒子比較大的粒子移動得更快。確定顆粒大小時，通常使用三種分布類型：(1)數量分布，報告不同大小“箱”中的顆粒數量；(2)體積分布報告不同尺寸類別的顆粒總體積；(3)強度分布，報告不同大小顆粒散射的光。也可以使用高分辨率納米粒徑分析儀NanocoulterⅠ來分析樣品中每種大小的囊泡的實際數量、濃度及粒子動態、Zeta電位等。為了進行分析，將先前儲存在-2...

外泌體分離方法之尺寸排阻色譜分離法：尺寸排阻色譜(SEC)用于根據尺寸而非分子量分離大分子。該技術應用了一種填充有多孔聚合物珠子的柱子，該珠子含有多個孔和隧道。分子根據它們的直徑穿過珠子。小半徑分子通過色譜柱的孔遷移需要更長的時間，而大分子從色譜柱中洗脫得較早。尺寸排阻色譜可以精確分離大分子和小分子。此外，該方法可以應用不同的洗脫溶液。與離心機離心方法相比，色譜分離具有較多的優勢，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，避免了因剪切力所造成的囊泡結構改變。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中存在的外泌體的技術。此外，SEC方法與超濾相結合已用于分離和分析尿源性外泌體。此外，流場-流分...

外泌體分離方法之密度梯度離心法：這種方法將超速離心機的超速離心與蔗糖密度梯度相結合。具體地說，密度梯度離心用于將外泌體與非囊泡顆粒（例如蛋白質和蛋白質/RNA聚集體）分離。因此，該方法將囊泡與不同密度的顆粒分離。足夠的離心時間比較重要，否則如果外泌體部分具有相似的密度，則仍可能在外泌體部分中發現污染顆粒。該結構不會讓大于1μm的細胞和其他顆粒進入布線區域。一些較小的顆粒和細胞碎片可以進入微柱區域，但被納米纖毛排除，形成直徑為30-200nm的孔。纖毛結構選擇性地捕獲外泌體和小細胞外囊泡。外泌體膜表面富含糖基化蛋白和糖基化脂質，這種糖基化在外泌體相互作用和定位中具有重要作用。細胞外泌體分離價格外...

外泌體分離方法之免疫學分離方法：免疫學分離法是利用受位于外泌體膜中的選定蛋白質標記物影響的抗體對外泌體進行標記。這些標記的外泌體可以進一步輕松處理和純化，例如，使用微芯片或磁珠。磁分離后，外泌體被純化，磁珠被溶解和去除。通過這種簡單快速的方法，就可以獲得較高純度提取物，但不會分離出缺乏磁性標記抗體識別的表面標記的外泌體，這可能導致外泌體池表現效果不佳。這種方法雖然既省時又直接，輸出純度較高，但也需要較為昂貴的試劑。外泌體可通過特定的組裝和功能修飾，提高其對宿主細胞的選擇性靶向性。杭州快速提取外泌體報價表外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態的完整，特異性高...

對于外泌體的標記和鑒定，獲得外泌體之后，如何對其進行鑒定又是一個困擾研究者的問題。國際細胞外囊泡學會(ISEV)在2014年提議，對于分離獲得的外泌體需要從三個層面進行鑒定：WB檢測外泌體標志蛋白表達情況：外泌體膜上富含參與外泌體運輸的跨膜蛋白家族(CD63/CD81/CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60/HSP70/HSPA5/CCT2/HSP90)和一些細胞特異性蛋白。其中CD63/TSG101是較常用到的外泌體標志物。TEM鑒定外泌體形態：電鏡具有較高的分辨率，可以直接觀察到樣品中外泌體的形態。NTA檢測外泌體粒徑及濃度：TEM可以觀察外泌體的形態學特征，但無法體現樣本中所有外泌體的粒徑...

外泌體（細胞外囊泡）目前被認為是通過生物活性脂質、蛋白質以及RNA來進行細胞之間的通訊，同樣外泌體也是目前研究較深入的細胞外囊泡，外泌體的直徑只有我們頭發直徑的百萬分之一（30~150nm），當多泡體與細胞膜融合時釋放到細胞外的時候，富含許多生物活性分子，如脂質、蛋白質、轉移RNA以及微小RNA等就會被外泌體被釋放到細胞外，這樣一來就可以被微環境中的靶細胞吸收并且通過通過生物體液運送到遠處。而外泌體與“目標”進行交流方式主要有兩種途徑，一是通過胞吞作用被攝入到細胞內；二是通過膜融合的方式來與靶細胞膜進行融合，接著就會直接釋放其中含有的物質以及信息至靶標細胞，其實外泌體的作用形式是相互的靶細胞分...

外泌體的表征分析：動態光散射：使用Anton-PaarLightsizer500粒子分析儀測定外泌體制劑中的粒度分布。動態光散射測量由于溶液中粒子的布朗運動引起的散射光強度的動態波動，（685nm的激光，檢測角度為15、90、175度）；較小的粒子比較大的粒子移動得更快。確定顆粒大小時，通常使用三種分布類型：(1)數量分布，報告不同大小“箱”中的顆粒數量；(2)體積分布報告不同尺寸類別的顆粒總體積；(3)強度分布，報告不同大小顆粒散射的光。也可以使用高分辨率納米粒徑分析儀NanocoulterⅠ來分析樣品中每種大小的囊泡的實際數量、濃度及粒子動態、Zeta電位等。為了進行分析，將先前儲存在-2...

外泌體是由正常或病理條件下的細胞所分泌，含有各種膜蛋白和胞質蛋白。因此，外泌體蛋白也可以作為生物試劑潛在地用于蛋白診斷。外泌體中發現的十種蛋白質主要包括熱休克蛋白8(HSPA8)、CD63抗原(CD63)、β肌動蛋白(ACTB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、烯醇化酶1α、細胞溶質熱休克蛋白90α(HSP90AA1)、CD9、CD81、酪氨酸3-單加氧酶/色氨酸5-單加氧酶打開蛋白、zeta多肽(YWHAZ)、肌肉酸激酶(PKM2)。外泌體蛋白屬于各種功能組，例如四跨膜蛋白（CD9、CD63和CD81）、熱休克蛋白（HSC70和HSC90）、膜轉運蛋白（GTPases）和脂質結合蛋白。外泌體標記物及...

外泌體分離方法之親和層析分離法：在親和層析分離法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素將結合存在于外泌體表面的糖基化蛋白質，從而使外泌體沉淀。Vn肽分離技術基于其對含有HSP的細胞外顆粒的高親和力。然而，這種方法比較容易使提取物被膜表面上含有上述標記物的細胞和其他顆粒污染。外泌體分離方法之介電泳分離法：介電泳分離法主要利用不同大小的粒子在不均勻電場中的位置差異。外泌體被吸引到高電區域，而較大的顆粒將位于低電區域。該方法速度快，適合用于高通量篩選，但缺點是需要加熱。外泌體的分離方法可能還存在一定的局限性和偏差。蘇州外泌體費用外泌體分離方法之沉淀分離方法：：基于聚合物的沉...

對于外泌體的標記和鑒定，獲得外泌體之后，如何對其進行鑒定又是一個困擾研究者的問題。國際細胞外囊泡學會(ISEV)在2014年提議，對于分離獲得的外泌體需要從三個層面進行鑒定：WB檢測外泌體標志蛋白表達情況：外泌體膜上富含參與外泌體運輸的跨膜蛋白家族(CD63/CD81/CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60/HSP70/HSPA5/CCT2/HSP90)和一些細胞特異性蛋白。其中CD63/TSG101是較常用到的外泌體標志物。TEM鑒定外泌體形態：電鏡具有較高的分辨率，可以直接觀察到樣品中外泌體的形態。NTA檢測外泌體粒徑及濃度：TEM可以觀察外泌體的形態學特征，但無法體現樣本中所有外泌體的粒徑...

外泌體分離方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技術通常包括將生物流體與含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速離心。用于基于聚合物的沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。這種聚合物的沉淀可以對分離的外泌體產生溫和影響而且可以產生中性的pH值。由此，出現了幾種常見的外泌體試劑盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速執行，無需額外設備，只需用高速離心機進行超速離心可以獲得高產量的外泌體。但是此方法的缺點是：非外泌體材料對外泌體分離物的污染仍然是基于聚合物的分離方法的一個問題。此外，分離物中...

外泌體分離方法之親和層析分離法：在親和層析分離法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素將結合存在于外泌體表面的糖基化蛋白質，從而使外泌體沉淀。Vn肽分離技術基于其對含有HSP的細胞外顆粒的高親和力。然而，這種方法比較容易使提取物被膜表面上含有上述標記物的細胞和其他顆粒污染。外泌體分離方法之介電泳分離法：介電泳分離法主要利用不同大小的粒子在不均勻電場中的位置差異。外泌體被吸引到高電區域，而較大的顆粒將位于低電區域。該方法速度快，適合用于高通量篩選，但缺點是需要加熱。外泌體的組成成分包括脂肪、糖、蛋白質等，對其組成成分的分析有助于了解其生物學功能和生理調節作用。蘇州快速提...

外泌體的構成：外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年，Valadi等發現鼠的肥大細胞分泌的exosome可以被人的肥大細胞捕獲，并且其攜帶的mRNA成分可以進入細胞漿中可以被翻譯成蛋白質，不只是mRNA，exosomes所轉移的microRNA同樣具有生物活性，在進入靶細胞后可以靶向調節細胞中mRNA的水平。這一發現使得研究人員對exosome的研究熱情激增，截止已經通過286項研究發現了41860種蛋白質、2838種microRNA、3408種mRNA。一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4,RAB5和R...

外泌體的構成：除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯蛋白（包括膜聯蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族（CD63,CD81和CD9）、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33（結腸上皮細胞來源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細胞）。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶（烯醇化酶1,醛縮酶1,PKM2,PGK1,PDIA3,GSTP1,DPP4,AHCY,TPL1,抗氧化蛋白,P4HB,LDH,...

分離外泌體的方法之微流控分離：基于微流體的外泌體分離可以包括用于外泌體捕獲的免疫親和方法，納米多孔膜篩分方法或微柱上的納米線用于外泌體捕獲。所有三個系統都需要具有粘彈性分析和電操作的芯片才能進行外泌體分離過程。外泌體的特異性很高，采用基于微流控芯片的免疫親和捕獲方法。尺寸范圍在40-100nm之間的外泌體被這種微流體芯片特異性地捕獲，在外泌體分離和定量方面的益處。篩分方法可用于通過壓力或通過電泳從全血中過濾外泌體，壓力的利用使分離時間更短，電場導致高外泌體純度。特異性、可重復性、低分離時間和更低的分離成本是基于微流體的外泌體分離的一些優點。外泌體通過它們攜帶的間質基質組分，在宿主細胞中誘導上皮...

外泌體的表征方法：根據藥物遞送系統(DDS)表征外泌體結構至關重要，因為它決定了DDS的特性，例如細胞或組織親和力、應激反應、吸收途徑和藥物釋放。2014年和2018年國際細胞外囊泡學會(MISEV2018)提出了外泌體（包括研究和外泌體制備）應滿足的基本要求指南。在開發基于外泌體的DDS時，必須考慮數量、大小、形態、膜組成和蛋白質（包括受體）等參數。這些參數表征所用的技術主要為光學、非光學和微流體技術。外泌體的表征方法之非光學方法：FTIR光譜和衰減全反射FTIR(ATR-FTIR)常用于外泌體質量量化和脂質和蛋白質含量的總體估計。使用TRPS，可以同時測量大小、濃度和zeta電位。由于掃描...

外泌體的表征方法：根據藥物遞送系統(DDS)表征外泌體結構至關重要，因為它決定了DDS的特性，例如細胞或組織親和力、應激反應、吸收途徑和藥物釋放。2014年和2018年國際細胞外囊泡學會(MISEV2018)提出了外泌體（包括研究和外泌體制備）應滿足的基本要求指南。在開發基于外泌體的DDS時，必須考慮數量、大小、形態、膜組成和蛋白質（包括受體）等參數。這些參數表征所用的技術主要為光學、非光學和微流體技術。外泌體的表征方法之非光學方法：FTIR光譜和衰減全反射FTIR(ATR-FTIR)常用于外泌體質量量化和脂質和蛋白質含量的總體估計。使用TRPS，可以同時測量大小、濃度和zeta電位。由于掃描...

外泌體分離方法之免疫學分離方法：免疫學分離法是利用受位于外泌體膜中的選定蛋白質標記物影響的抗體對外泌體進行標記。這些標記的外泌體可以進一步輕松處理和純化，例如，使用微芯片或磁珠。磁分離后，外泌體被純化，磁珠被溶解和去除。通過這種簡單快速的方法，就可以獲得較高純度提取物，但不會分離出缺乏磁性標記抗體識別的表面標記的外泌體，這可能導致外泌體池表現效果不佳。這種方法雖然既省時又直接，輸出純度較高，但也需要較為昂貴的試劑。外泌體可以傳遞生物分子，例如蛋白質、DNA、mRNA等，影響接收器細胞的表現型和生理活性。煙臺血漿外泌體分離生產商外泌體是直徑為30-150nm的小細胞外囊泡。在生理和病理條件下，幾...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不普遍。二是微流控分離法，該方法通過負壓及震蕩等機械原理分離外泌體，產量純度均具有較大幅度提高，但需要特定設備配合。外泌體分離方法之納米粒徑分析法：確定性橫向位移依賴于顆粒流動路徑的變化，而顆粒流動路徑取決于顆粒尺寸。這種方法雖然比較簡單，但是需要使用掃描電鏡技術、動態光散射技術、納米粒子跟蹤分析技術、單粒子干涉反射成像傳感器（SP-IRIS）技術等。對于外泌體大小、形態、外泌體的濃度、zeta電位等分析也可以使用粒度分析儀。外泌體的純化可以通過單顆粒色譜等技術實現。南京腦脊液外泌體分...

外泌體衍生物miRNA的重要應用：miRNA的靈敏生物標志物測定法主要用于檢測早期階段(0-1)疙瘩的存在。除了基于組織活檢的當前研究外，循環miRNA的研究是生物標志物研究中一個新的擴展領域，因為它們具有所有特征（miRNA分析、診斷、預后、治著反應和預測性生物標志物），可在液體活檢（生物體液）中檢測到,并且不需要對病人進行健康和疙瘩活檢。血液樣本等體液分析檢測使醫生和研究人員能夠及早了解病癥的發展狀況。miRNA被稱為基因表達的基本調節因子，尤其是在病癥中，并且在疙瘩發生、轉移和對各種療法的耐藥性中發揮重要作用。據報道，哺乳動物細胞每個細胞含有大約100,000個內源性miRNA分子。據估...

外泌體還參與神經退行型癥。在神經退行型癥個體的腦脊液和外周血中已檢測到幾種特定于阿爾茨海默氏癥、帕金森氏癥和Creutzfeldt-Jakob的聚集蛋白。特別是，在從阿爾茨海默者的腦脊液樣本中獲得的外泌體中檢測到Thr-181磷酸化的tau。在Thr-181磷酸化的Tau是阿爾茨海默的既定生物標志物。此外，α-突觸核的蛋白也常在阿爾茨海默者的群體中檢出。此外，在尿液中發現的外泌體標志物也可以是膀胱和前列腺疙瘩的標志物。比如：視黃酸誘導蛋白3(GPRC5A)、抵抗素、外泌體蛋白PCA-3、TMPRSS2:ERG、α1-抗胰蛋白酶、組蛋白H2B1等。除了腦和泌尿道疙瘩外，外泌體蛋白也可以是胰腺病的...

外泌體分離方法之篩分分離法:該技術是通過膜從生物液體中篩分外泌體并通過壓力或電泳進行過濾來分離外泌體。篩分分離法的分離時間較短，但分離的外泌體純度卻處于較高的水平。篩分分離法的缺點在于分離的外泌體回收率較低。總之，細胞外泌體提取、外泌體分離在疙瘩等研究領域發揮著重要作用。細胞外泌體分離方法目前多數還是采用高速離心機進行離心分離的技術方法，然而，其他幾種分離技術，如過濾法、免疫分離法和篩分法，雖然也能進行外泌體分離，但每種方法都有其局限性，多數還是只應用于實驗室、科學研究等領域。外泌體介導的RNA轉移對基因表達水平和遺傳數據傳遞具有重要的調節作用。合肥外泌體分離生產廠家外泌體衍生物miRNA的重...

外泌體的作用機理：細胞受損從而會引起各種肌膚問題，如痘痘、斑、細紋、毛孔、紅血絲等等，外泌體相當于人體內細胞的信使，是將沒有細胞核的細胞，有效的作用于受損細胞，從而來補充受損細胞的完整性，來改善肌膚問題。外泌體與中胚層相比的優勢：外泌體屬于內源性抵衰，作用于細胞，從源頭解決皮膚問題，修復與再生細胞，重返20-25歲時期的細胞活力，恢復年輕態，光速起效（2-10天，白，嫩，滑，閉口消失），極速恢復（36小時-72小時，肉眼可見速度在愈合）提高皮膚疫力，相當于抵老“疫苗”（現有產品解決的是當下和延緩衰老，而外泌體聚焦的是現在與未來）。外泌體在人體的主要作用是充當局部和全身信號和調節系統。鄭州肺泡外...

外泌體分離方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技術通常包括將生物流體與含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速離心。用于基于聚合物的沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。這種聚合物的沉淀可以對分離的外泌體產生溫和影響而且可以產生中性的pH值。由此，出現了幾種常見的外泌體試劑盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速執行，無需額外設備，只需用高速離心機進行超速離心可以獲得高產量的外泌體。但是此方法的缺點是：非外泌體材料對外泌體分離物的污染仍然是基于聚合物的分離方法的一個問題。此外，分離物中...

外泌體是直徑為30-150nm的小細胞外囊泡。在生理和病理條件下，幾乎所有類型的細胞都可以釋放外泌體，在細胞通訊和表觀遺傳調控中發揮重要作用。外泌體天然存在于體液中，包括血液，唾液，尿液和腦脊液等，內部含有其來源細胞的核酸，蛋白等物質，因此基于外泌體的疾病診斷和治著方法得到了深入的研究。但是如何拿到純凈的外泌體一直是外泌體研究所面臨的難題之一，因此研究人員也開發了許多外泌體分離的方法，來一起看一下吧。差速離心法：離心力從300×g到100,000×g的下進行多次循環離心，較后收集外泌體顆粒。密度梯度離心法：等密度梯度超速離心法是通過從下到上逐步降低密度分層。動區梯度超速離心法由兩個梯度介質部分...

外泌體分離方法之沉淀分離方法：：基于聚合物的沉淀分離方法是利用超親水聚合物來增強小尺寸顆粒（如外泌體）的沉淀。聚乙二醇的常用濃度在8%到15%之間變化。使用這種方法，將含有外泌體的溶液與聚合物一起孵育過夜，并在約10,000×g下進一步離心。外泌體分離方法之FFF分離法：FFF目前是一種很少使用但前景不錯的一種外泌體分離方法。分離由橫流力驅動，并基于顆粒的分子量或流體動力學直徑。它包括高純度、高效率和短時間處理，但迄今為止，FFF在外泌體分離中的使用案例較少，還有待進一步開發。分離樣品前的處理對較終外泌體分離的效果有較大影響。南京組織提取外泌體分離價格外泌體分離方法之免疫學分離方法：免疫學分離...

外泌體的表征方法之微流體分析技術：微流體技術在外泌體研究方面也起著推動作用。微流體技術不只提供了高質量、高特異性的數據，并且試劑消耗量低，通量高.基于微流體技術的研究方法需要結合使用微流控芯片，微流控芯片通常由玻璃基和聚二甲基硅氧烷(PDMS)膜制成，包含許多尺寸適合所分析樣品的微通道。主要區別在于芯片的內表面，可以通過多種方式對其進行功能化，例如通過涂層、多層沉積、電沉積和蝕刻.目前研究中針對不同的微流控表征方法，也制造了不同類型的微芯片，包括免疫芯片、磁性芯片和電化學芯片。外泌體及其蛋白質也可以通過比色法（標記抗體/ELISA）、直接熒光染色（DiO染料）、電化學性質變化和光學特別方法進行...

外泌體蛋白質特征是:膜結合四跨膜蛋白（CD9、CD63、CD81和CD82），以及常規用于分離的EpCAM和Rab5。其他公認的蛋白質是受體（CD46和CD55）、熱休克蛋白（HSP；Hsc70、Hsp70和Hsp90）、參與外泌體形成的蛋白質（Alix、TSG101）和負責融合和轉運的膜蛋白（GTP酶、膜聯蛋白和flotillin；ATP7A、ATP7B、MRP2、SLC1A4、SLC16A1和CLIC1)等。使用ELISA法檢測這些標記蛋白可以用于確認外泌體的存在。也有相關研究稱外泌體含有其他顆粒，如膽固醇（B淋巴細胞來源）、鞘脂、磷酸甘油酯和神經酰胺等。外泌體還運輸形態發生素（Hedge...

分離外泌體的方法之免疫親和相互作用：免疫親和法是利用外泌體表面蛋白（抗原）與其靶抗體或分離配體分子之間的免疫親和相互作用原理分離純外泌體的理想方法。它有助于根據其表面標志物分離特定類型的外泌體。基于微孔板的酶聯免疫吸附測定（ELISA）是免疫親和分離試劑盒的一個例子，用于根據外泌體表面標志物分離外泌體。Tetraspanin蛋白是這種分離方法的決定因素。抗CD9、抗CD63和抗CD81是免疫親和外泌體分離中使用的抗體的常見示例。免疫親和法可用于從結腸病細胞中分離外泌體，其效率高于超速離心和密度梯度分離。另外還有一種外泌體分離方法，該方法采用抗體包被的基于磁性顆粒的技術來分離外泌體。未來可開發更...