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連云港慢病毒載體整合位點實驗室

來源: 發布時間:2024-06-12

f如果RCT設計不可行,申請人可能在確證性臨床試驗中采用單臂試驗(singlearmtrial,SAT)。在這種情況下,申請人應解釋無法開展RCT試驗的理由并提供相應研究證據,并有必要利用回顧性數據、前瞻性真實世界研究、薈萃分析或流行病學調查等數據及探索性研究結果,對受試人群、主要終點和預期臨床療效等研究要素進行合理說明。RCT確證性試驗應在可行的情況下盡量保持盲法。對于很多免疫細胞zhiliao產品,由于研究者或醫務人員參與細胞的采集并配合操作給藥過程,可能難以對研究者設盲,這種情況下有必要采用其它方法降低試驗的偏倚,例如對受試者設盲。如果盲法不可行,如SAT,應設立不受研究者影響的單獨審評委員會(independentreviewcommittee,IRC),對臨床終點進行判讀并作為主要終點的判定標準,或對研究者評估的結果進行敏感性分析。整合位點相比γ-逆轉錄病毒更安全但成本更高。連云港慢病毒載體整合位點實驗室

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通常不需要進行標準的遺傳毒性組合試驗,但應根據基因zhiliao產品的特點、產品的具體適應癥、載體的已有信息、導入基因序列結構等,評估基因zhiliao產品整合進基因組的可能性,判斷是否需要開展另外的遺傳毒性研究,如研究基因組修飾的發生情況,并檢測隨后可能發生的異常細胞行為;評估插入突變(插入位點、插入拷貝數等)引起的遺傳毒性風險。當基因zhiliao產品采用基因編輯或轉座子技術時,需要關注脫靶編輯、轉座子轉座印跡引起的遺傳毒性問題;鑒定/表征基因組整合位點。南通載體整合位點方法整合位點政策,推薦唯可生物,實驗實力強,專業性高,檢測效率高,結果準確率高。

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病毒載體介導的外源基因隨機插入的可能風險之一是其可能整合到宿主細胞的原基因或抑基因內引發插入性誘變(insertionalmutagenesis),導致基因的jihuo或抑基因的抑制,從而誘導的發生。這些潛在的副作用已經引起人們的極大關注,因此亟需發展普適的整合位點檢測手段來評估以病毒為載體的基因zhiliao的安全性。病毒載體整合位點檢測能夠特異性捕獲整合位點序列,經過文庫構建、二代測序及生物信息學分析,即可得出病毒載體在細胞中的整合位點。

遲發性不良反應相關的潛在風險因素在評估基因zhiliao產品的風險因素時,申請人應考慮基因zhiliao產品的特性,同時參考該產品的非臨床和臨床數據以及類似產品的已知數據。基因zhiliao產品的非臨床研究旨在為臨床研究提供支持性信息和關鍵安全性特征參數,如機體中的生物分布和持久性、整合/修飾宿主基因組、潛伏再jihuo以及潛在免疫原性等。對于新型基因zhiliao產品,可參考數據有限,申請人應盡可能在非臨床研究中獲得用于評估遲發性不良反應風險的數據。對T細胞受體(TCR)β鏈庫進行深度測序(TCR-seq)以及慢病毒載體整合位點(LVIS)分析。

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病人在6個月后達到MRD陰性,CAR-T細胞在4.2年后仍然可以在外周血檢測到,并且骨髓中檢測不到B細胞liu克隆。二代測序整合位點分析顯示這是因為某些CAR-T細胞的融合位置位于TET2基因9號到10號外顯子之間可變剪切區域,導致TET2基因跳讀和功能障礙,從而產生短壽命記憶細胞擴增和長壽命記憶細胞。使得藥物可以持久作用于病人。研究者繼而進行插入位點和CAR-T細胞擴增及持續作用時間的相關研究,利用慢病毒插入位點信息(INSPIIRED)和LASSO logistic 回歸模型進行插入位置和藥效學分析,初步建立預測模型。研究者還建議在CAR-T產品回輸前進行類似的多變量預測可以對產品的安全性和有效性進行更為有效的評估。慢病毒載體在宿主全基因組范圍內的整合位點傾向性分析。南通載體整合位點方法

含有完整的外源DNA全部整合結構、插入位點旁側序列和受體基因組在整合位點附近重排結構的CCS reads。連云港慢病毒載體整合位點實驗室

2020年9月發布的《細胞zhiliao產品申請臨床試驗藥學研究和申報資料的考慮要點》“生產工藝開發的技術要求”及“質量研究和質量控制中的安全性研究”部分要求提供目的基因在染色體中的整合情況及提供細胞惡性轉化(成瘤性和致瘤性)進行安全性研究和評估內容。2020年2月發布的《免疫細胞zhiliao產品臨床試驗技術指導原則(試行)》中規定:探索性臨床試驗的安全性和耐受性要考慮"外源基因隨機整合到細胞基因組形成插入突變,導致成瘤性和惡性轉化等"。連云港慢病毒載體整合位點實驗室

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