永生化的細胞系往往相當健壯，因此，使用實驗室自制的凍存培養基，效果也不錯。典型的配方是在生長培養基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細胞中的一些水，以防止冰晶形成，刺穿細胞。據賽默飛世爾科技的較深科學家RhondaNewman介紹，DMSO還能防止細胞在冷凍期間發生收縮，而后在解凍時又變得腫脹。血清，這種富含營養成分的物質，直接支持細胞?！爱敿毎幱谶@種營養豐富的環境時，它們能夠更好地復蘇。在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中，可使冰點降低，提高細胞膜對水的通透性。溫州正規無血清細胞凍存液直銷廠家

細胞凍存是將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，利用凍存技術可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。目前現有技術中，細胞凍存液中的主要成分有10％二甲基亞砜(DMSO)、20％～90％胎牛血清(FBS)、剩余組分為完全培養基。培養基以及FBS可為細胞提供必要的營養物質。DMSO是一種滲透性保護劑，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，從而達到降低細胞損傷的保護效果。但FBS屬于動物源性物質，成分比較復雜，在臨床應用上存在潛在的風險，也增加了污染的幾率，并且由于凍存液中含有動物血清，會導致凍存液的成分存在不穩定的因素。無錫正規無血清細胞凍存液報價無血清細胞凍存液，含多種保護劑成分。

細胞凍存注意事項：1、細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml－15m培養液，而在我的試驗中的經驗總結為培養基越少細胞越容易貼附。2、復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。3、加培養基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度，從如果你加培養基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是1％。所以如果你的凍存液的濃度是10％DMSO的話那么加10ml以上的培養基就恰好稀釋到了無害濃度。

使用方法：1)細胞超凈臺無菌環境，1.5mlEP管內加入細胞混懸劑均勻混懸細胞，細胞終濃度為5×106個/ml，混懸液體積為200μl。細胞凍存劑冰水混合物中預冷，逐滴加入細胞凍存劑800μl，細胞混懸劑與細胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫，降溫速率為1℃/min，較后降溫至-80℃以下進行凍存。將比較例1凍存后細胞的復蘇率與實施例5凍存后細胞的復蘇率進行對比，具體結果如附圖1所示，可見采用本發明的凍存方法能夠明顯提高細胞的復蘇率。其他實施例通過與比較例1進行比較，也得到相同的試驗結果。本發明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細胞復蘇率，同時還可減少不同批次細胞凍存復蘇率不穩定、以及避免由血清中的支原體，細菌，朊細菌及其他細菌顆粒引發的污染。無血清細胞凍存液產品性能：2-8℃即可穩定保存，無需冷凍，即取即用。

無血清凍存液使用方法：1、收集懸浮細胞或貼壁細胞，離心去除上清培養液。2、加入適量的細胞凍存液，重懸細胞，調節密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件：2-8C保存，年有效：-20C保存，兩年有效。無血清凍存液注意事項：1、請選擇對數生長期細胞進行凍存。2、凍存液加入細胞后，請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細胞，請轉移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套。無血清細胞凍存液產品性能：既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。寧波無血清細胞凍存液廠家現貨

無血清細胞凍存液的優勢：通用型，適用于凍存各種細胞系、原代細胞。溫州正規無血清細胞凍存液直銷廠家

無血清細胞凍存液：產品優勢：1.化學成分明確，無任何外源蛋白和血清，適用于各類動物細胞株凍存。2.無需程序降溫，細胞復蘇率90%以上。3.凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱，穩定保存數年。4.即用型產品，4℃可穩定保存。細胞凍存：1.收集融合率>90%的對數期的貼壁細胞或者懸浮細胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘，去除離心管中的上清液，收集細胞沉淀。3.加入適量細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為1x106～1x107cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細胞懸液。4.將離心管中的細胞懸液分裝與細胞凍存管中，每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細胞直接凍存于-80℃冰箱中，可穩定凍存數年。6.如若長期保存，可在次日轉移至液氮中。溫州正規無血清細胞凍存液直銷廠家