GUS染色步驟:1.將準備好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保溫1小時至過夜。2.葉片等綠色材料轉入70%乙醇中脫色2-3次,至陰性對照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察,白色背景上的藍色小點即為GUS表達位點。注:用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當操作大的組織和樣品時,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞。糖類從組織化學技術角度來分,可分為多糖、中性粘液物質。品質好的糖原染色試劑盒生產廠家
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。江蘇咨詢糖原染色試劑盒直銷價將動物殺死后迅速取出所需要的組織。
染色的一般原則:1.熒光素產品一般為微量試劑,取用前請離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細胞儀只可檢測單細胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細胞懸液,細胞數量不應低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養細胞。如果是貼壁細胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。
糖類染色:糖類從組織化學技術角度來分,可分為多糖、中性粘液物質、酸性粘液物質、粘蛋白及粘脂質。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變,故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。(1)肝及心肌糖原沉著癥的診斷:糖原染色顯示在肝或心肌細胞內有大量糖原存在即可確診。(2)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。(3)高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別:前者為陽性、后者為陰性,做此染色較易鑒別。(4)骨內骨外尤文氏肉瘤的診斷:此瘤80%細胞內有較多糖原,糖原染色為陽性,所以糖原染色為陽性(大多數細胞)可以協助診斷。(5)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。適用于教學和科研上的核染色質染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細胞的組織化學方法,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學試劑與細胞內的某些物質進行化學反應,從而在細胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內的生物化學成分進行定性、定位、定量研究主要用來顯示糖原和其他多糖物質,因此也稱作糖原染色。上海品質好的糖原染色試劑盒哪家便宜
對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。品質好的糖原染色試劑盒生產廠家
糖原染色(過碘酸-雪夫反應)原理多糖中乙二醇基經過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結果:胞漿中出現彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細胞的染色反應粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細胞-血小板系統:PAS反應呈粗大的紫色顆粒或團塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血?。涸剂<毎赎幮曰蛉蹶栃苑磻?,以彌散性為主;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應。品質好的糖原染色試劑盒生產廠家
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