糖原染色是病理學中常規的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的1,2-乙二醇基,使之變為二醛,醛不Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應用唾液通過顯微鏡對組織內的生物化學成分進行定性、定位、定量研究。山東口碑好的糖原染色試劑盒量大從優
糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結合后呈現紫紅色,沉積在細胞內多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞。
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細胞的組織化學方法,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學試劑與細胞內的某些物質進行化學反應,從而在細胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內的生物化學成分進行定性、定位、定量研究。
PAS染色的臨床意義:1.紅細胞系統:①紅血病或紅白血病時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比增高,陽性反應的程度也很強。有時紅細胞也呈陽性反應。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比也較高。有時紅細胞也可呈陽性反應。③巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,幼紅細胞為陰性反應,有時個別幼紅細胞呈陽性反應應該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動到細胞一側的現象,多數人認為是由于固定劑把細胞內的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內固定與保存,是針對糖的性質和避免糖原溶于水而采取的相應措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。江蘇品牌糖原染色試劑盒推薦廠家
亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥。山東口碑好的糖原染色試劑盒量大從優
網狀纖維染色:網狀纖維是非常細而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網狀,故有網狀纖維之稱。疏松組織中網狀纖維比較少,它多分布在結締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內,血管周圍以及造血部位,內分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網狀纖維。網狀纖維的變化,反映了疾病的發生和發展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網狀纖維的多少、粗細緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標,尤其是在臨床病理診斷中,可根據其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標本上,網狀纖維不易顯色。所以網狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置山東口碑好的糖原染色試劑盒量大從優