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來源: 發(fā)布時間:2024-03-07

膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì);3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團.所以與水結(jié)合的能力很強.這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中。它是研究成纖維細胞與細胞外基質(zhì)之間以及細胞之間相互作用的良好模型。天津正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家

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鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜。天津鼠尾膠原推薦廠家膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料。

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三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A.不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質(zhì)量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學(xué)強度極差,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進行SDS-PAGE,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,另一條帶的相對分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進行TEM和電子衍射觀察。除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。

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鼠尾膠原使用方法:1、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。三維膠原凝膠的制備:A、無細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值)。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時可形成具有一定強度三維膠。濟南鼠尾膠原報價

鼠尾膠原醋酸溶解:不建議用過濾的方法無菌化。天津正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家

對于生物科研汪們來說,大白鼠、小白鼠們簡直渾身是寶,從毛發(fā)、皮膚,到心肝脾肺,甚至各種排泄物,都是我們重要的研究對象。尾巴,自然也是。所以耗子尾汁不僅存在,甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊。沒有「耗子尾汁」,很多課題可能都沒辦法開展。在以小鼠為模式生物進行科學(xué)研究的實驗室中,日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA(脫氧核糖核酸)進行基因型鑒定,檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA??梢岳斫鉃榻o小動物做核酸檢測。天津正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家

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