無血清細胞凍存液的操作規范：1、培養細胞至對數生長晚期，顯微鏡觀察其外觀、形態、有無污染等。選擇狀態良好的細胞進行凍存操作(注：貼壁生長細胞，用胰蛋白酶消化并用完全培養基終止消化，進行細胞計數;懸浮生長細胞，進行細胞計數)。2、500～1000g離心5min，棄上清。3、加入適量的細胞凍存液，重懸細胞，使細胞濃度達到1～10×106/ml，置于凍存管中密閉。4、采取逐級降溫保存：4℃放置20min，-20℃放置30min，-70℃過夜，置于液氮罐中長期存儲。注意：務必超凈工作臺內無菌操作，避免污染。雜交瘤細胞凍存時應定期復蘇，以檢查細胞的活性和分泌抗體的穩定性。無血清凍存液用途：無血清細胞凍存液用于免疫細胞及干細胞的存儲。青島正規無血清細胞凍存液廠家批發價

細胞凍存中的注意事項：細胞凍存開始時，要溫好相應的培養基和相應的試劑，以及計數耗材，避免操作過程中手忙腳亂。用移液管吹打相應的胞液時，要保證移液管在液面以下吹打，管內要有液體，防止產生相應的氣泡，氣泡的張力會影響細胞的活率和生存狀態。計數細胞時要保證取胞液時也要混勻，這個過程比較重要，細胞不混勻，計數不準，此外吹打應該輕柔，避免細胞在吹打的過程中出現了相應的死亡。凍存離心用50ml離心管比較好，加凍存液吹打混勻比較方便，離心后不能過多地晃動離心管。當離心管液體較多的時候，可以直接傾倒，不要磕，多余的液體較好用泵吸出比較好。凍存支數少的情況，用泵頭輕柔吹打，避免出現氣泡，凍存支數多用移液管吹打。太原無血清細胞凍存液銷售廠家無血清細胞凍存液產品特色：可微量，原位凍存，例如雜交瘤細胞的凍存，省時高效。

凍存細胞注意事項：冷凍保護劑可降低培養基的冰點，并可減緩冷卻速度，較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細胞，導致細胞死亡)。注：DMSO可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時，應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范，并應按照當地法規處置此類試劑。建議可使用廠商生產的無血清細胞凍存液，使用方便，復蘇率高。注意冷凍保護劑DMSO的品質：DMSO應為試劑級等級，無菌且無色，以5-10ml小體積分裝，4℃避光保存，勿作多次解凍。

無血清細胞凍存液，細胞凍存與復蘇后，平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較，BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表，BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養的細胞凍存。復蘇細胞：1.將細胞凍存管由液態氮中取出，置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準備培養基、無菌15ml離心管、培養瓶。2.于生物安全柜內，直接以少量培養基反復沖融，使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養基，再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液，以新鮮培養基重懸細胞，移到培養瓶中培養。5.隔天更換新鮮培養基，并觀察細胞存活狀況。即用型產品，4℃可穩定保存。

干細胞無血清凍存液操作事項：使用說明：1.細胞消化和計數，用胰酶對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數。2.1000轉/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。3.根據細胞計數的情況，加入適量的干細胞無血清凍存液，使細胞密度在1×106左右（或根據自己希望達到的細胞密度）。4.輕輕地重懸細胞（務必重懸均勻）。5.將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標記或者貼上標簽）中，旋緊凍存管蓋。6.將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。7.第二天將細胞從-80℃轉移到液氮中。注意事項：1.用處于對數生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間，切記消化過度，會影響復蘇效果。3.重懸細胞的過程中，請務必要輕柔，以免損傷細胞，但同時也一定要充分重懸，這樣細胞在復蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。無血清細胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。武漢無血清細胞凍存液平均價格

無血清細胞凍存液存儲條件：為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低。青島正規無血清細胞凍存液廠家批發價

細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清，可以現用現配。除了這個方式，還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清，配成兩倍的儲存液，在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用，特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環境中保存。使用細胞凍存液需要注意以下幾點：1、在使用凍存液前，需要確保細胞凍存液已經完全融化，并要輕輕的混勻。對融化后的細胞凍存液要置于4℃的環境中保存。2、使用凍存液之前應該確保凍存前的細胞生長情況比較良好，比如說細胞需要處于對數生長期，并且凍存的時候存活率大于90%。3、在使用細胞凍存液期間，為了保證可以發揮較佳的效果，建議將細胞凍存在液氮之中，這樣可以長時間的進行保存。如果說將細胞置于-80℃的環境下保存，那么保存的時間大約為1年。4、細胞凍存液如果需要做標記的話，要使用耐受有機溶劑的馬克筆進行標記，以防被酒精或異丙醇等擦掉，不能辨識。青島正規無血清細胞凍存液廠家批發價