腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經水浴、反復輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束。隨后加入培養基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結構和茶托狀形態，含有豐富的內含物（包括核酸、蛋白和脂質等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。太原正規外泌體提取試劑推薦廠家

密度梯度離心法該方法由于比較繁瑣，用的較少。原理是：像所有的脂質小囊泡一樣，外泌體可以懸浮于特定密度梯度的蔗糖中，其密度范圍1.13g/ml-1.21g/ml，將要分離外泌體的樣本液體置于梯度蔗糖介質上，隨后通過離心將外泌體分離。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時，對離心時間極為敏感。具體步驟是：收集培養2d的上清液。將培養上清液先以1500r/min離心5min除去細胞及碎片,再依次以1000×g離心10min取上清,10000×g離心30min取上清,然后用100ku超濾離心管(Millipore)濃縮至15mL,昆明正規外泌體提取試劑直銷廠家外泌體提取：回收率不穩定（可能與轉子類型有關），純度也受到質疑。

專利申請利用分離培養人尿液來源細胞并收集培養基來進行體外培養，直接把外泌體從尿液中沉降下來，無須分離培養人尿液來源細胞并收集培養基。人尿液來源細胞的外泌體的獲取方法，是首先分離培養人尿液來源細胞并收集培養基，將人尿液來源細胞的培養基通過0.22微米濾膜過濾，以去除大的細胞殘片以及其它雜質；然后離心除去細胞器，留取上清；再使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后，使用PBS對膜進行洗脫即得到外泌體濃縮液。

1983年，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。外泌體提純試劑盒的特色與優勢：樣本輸入量多樣。

當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而啟動靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合，從而啟動細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。外泌體：形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統，影響細胞的生理狀態并與多種疾病的發生與進程密切相關。杭州正規外泌體提取試劑哪家好

由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質。太原正規外泌體提取試劑推薦廠家

近年來，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應用已經涉及一些病癥治病領域、醫學基礎和免疫領域、寄生蟲領域；臨床研究上已涉及心血管系統、內分泌代謝系統等。外泌體來源及內含物。幾乎所有類型的細胞都可以分泌外泌體，同時外泌體也普遍存在于體液中，包括血液、眼淚、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究發現外泌體中富含核酸（microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA等）、蛋白、膽固醇等。外泌體的表面marker主要有CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27等。外泌體鑒定。目前對于外泌體的鑒定主要有四種方法：透射電子顯微鏡（TEM）、Nanosight、WesternBlot、流式細胞術。太原正規外泌體提取試劑推薦廠家