無血清細(xì)胞凍存液：細(xì)胞凍存及復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中的重要技術(shù)，細(xì)胞凍存是細(xì)胞長期保存的重要手段。細(xì)胞凍存液，作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液，其作用是將需要凍存的細(xì)胞懸浮于凍存液，供給細(xì)胞生命代謝所必須的營養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)可以防止或減少冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷作用。在現(xiàn)有技術(shù)中，一般使用培養(yǎng)基、血清和二甲亞砜(DMSO)按照一定比例混合的方法來凍存細(xì)胞，DMSO用量為10％，過低的DMSO濃度會(huì)導(dǎo)致凍存效果欠佳，但高濃度的DMSO有較大毒性，會(huì)對(duì)細(xì)胞體造成傷害；且傳統(tǒng)凍存液配方中所使用的血清成本高，增加動(dòng)物病原污染的可能性。此外，有研究表明長期與胎牛血清接觸的細(xì)胞會(huì)對(duì)溶液介質(zhì)中的胎牛血清發(fā)生內(nèi)吞，內(nèi)吞胎牛血清后的間充質(zhì)干細(xì)胞有可能發(fā)生某些蛋白表達(dá)的變化，應(yīng)用于人體后可發(fā)生異種動(dòng)物蛋白引起的免疫反應(yīng)，不能直接用于臨床輸注。因此，利用含有血清的凍存液凍存的細(xì)胞會(huì)給臨床使用帶來一定的風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法。廈門南昌無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液是一種無血清細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存（>5年）。CELLSAVING配方成分明確，不含動(dòng)物來源性蛋白，不含血清，可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存液操作簡便，無需程序降溫，可在-80度或液氮中長期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液，埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力，穩(wěn)定保持細(xì)胞特性，以及細(xì)胞多能性，并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過動(dòng)物直接注射實(shí)驗(yàn)檢測，包括靜脈注射，皮下注射途徑，無明顯細(xì)胞毒性，動(dòng)物安全性非常高。南昌正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：胎牛血清取自牛，因此，難以應(yīng)用到需要避免接觸動(dòng)物源的應(yīng)用領(lǐng)域。

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”，這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多用二甲基亞砜（DMSO）作為保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性；緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的物理損傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。血清完全細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方有效提高細(xì)胞存活率和活力。不含動(dòng)物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等污染，確保凍存細(xì)胞安全。適合用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。

無血清細(xì)胞凍存液對(duì)比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢：傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜），較后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲(chǔ)存。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個(gè)小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡。）無血清細(xì)胞凍存液使用方法：將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。

細(xì)胞凍存的基本原理：細(xì)胞代謝過程需要各種蛋白酶的參與，而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作，低溫貯藏的目的是通過較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài)，使細(xì)胞“不會(huì)老”，所以可以長期保存。因?yàn)閮鋈谶^程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的，因此，需要開發(fā)出有效的技術(shù)來防止細(xì)胞死亡和損傷。低溫保護(hù)劑可保護(hù)細(xì)胞不受細(xì)胞內(nèi)冰凍影響，目前多采用DMSO，甘油，乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護(hù)劑。它們的作用機(jī)制包括：自由進(jìn)入細(xì)胞，取代水，使冰點(diǎn)下降，充當(dāng)鹽的二次溶劑，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性。可以防止或減少冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷作用。廈門南昌無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液：一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞。廈門南昌無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存秘籍：細(xì)胞凍存對(duì)于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞，通常每分鐘下降-1至-3℃。控制冷卻過程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng)。如果沒有程序降溫系統(tǒng)，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過夜。雖然這種方法適用于許多細(xì)胞系，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的冷卻，不建議用于珍貴細(xì)胞。無論使用哪種冷卻方法，重要的是快速高效地將其傳輸?shù)捷^終存儲(chǔ)位置。如果轉(zhuǎn)移不能立即完成，可以將小瓶置于干冰上一段時(shí)間。這樣可以避免在轉(zhuǎn)移過程中發(fā)生溫度升高而損害細(xì)胞。在這個(gè)轉(zhuǎn)移過程中溫度升高是解凍后影響細(xì)胞活力的主要原因。廈門南昌無血清細(xì)胞凍存液