外泌體研究的主要應用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血病(AML)細胞的增殖、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉移過程。免疫。β細胞將含有蛋白質和miRNA的外泌體釋放到細胞外,并可轉移到其他代謝部位或免疫內皮細胞,有利于維持葡萄糖體內平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉移到內皮細胞導致了內皮細胞的損傷促進動脈硬化。分子標記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞病中發現循環EVs的水平上升。預后標志。同時對超速離心機的設備要求以及操作程序的培訓較大提高了提取成本。廣州正規外泌體提取試劑哪里買
外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯系緊密,研究思路可以分為三大類:表達譜、分子標志物和分子機制方向,其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數據為主要內容,短平快發表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎之上加入大量樣本驗證,建立ROC、KM曲線,分析分子與臨床疾病的相關性為主,通常文章影響因子在3-10分之間。分子機制研究,顧名思義要做到細胞功能、機制研究深度,因此工作量通常較大,影響因子通常能夠上10+。唐山正規外泌體提取試劑產品介紹在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,與多種疾病的發生和進程密切相關。貴陽外泌體提取試劑供應商外泌體提取:較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑。
在無菌條件下提取人體體液,并用PBS緩沖液進行稀釋,然后通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片,制成體液樣本備用;體液樣本純化:通過過濾膜對上述體液樣本進行過濾,進一步去除體液中的細胞殘片及其他雜質,靜置10~15分鐘,留取沉淀物備用;外泌體提取:將上述沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層,然后用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體,置于80℃儲存備用。此提取方法條件復雜,成本高,專利申請利用靜置不太可能把外泌體沉降下來;根據外泌體表面的特異生物化學特性通過提取試劑的特異配方把外泌體從水相中沉降下來。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。
CD47是信號調節蛋白α(SIRPα,也稱為CD172a)的配體,CD47-SIRPα間的結合能夠發出“不要吃我”的信號,從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進胰腺病細胞增殖,增強胞飲作用從而促進一些病癥細胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細胞有一定毒性作用,但使用外泌體能夠較小化對細胞的毒性。研究人員發現,CD47和病基因KRAS驅動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環系統的清理,并增強胰腺病細胞對外泌體的特異性。所以,外泌體的這種特性增強了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期。離心除去細胞器,留取上清。
外泌體在肺病進程中的作用:肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據相關報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調節基質細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進一些病癥血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外,有研究發現,外泌體中的內容物可以觸發上皮-間質轉化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,促使人正常支氣管上皮細胞出現EMT,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現增殖,遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不普遍。外泌體的特殊結構和功能,使得它具有潛在的應用價值,可以作為診斷多種疾病的生物指標。貴陽外泌體提取試劑供應商
外泌體的提取方法:密度梯度離心。廣州正規外泌體提取試劑哪里買
2015年,隨著精細醫學概念的提出,越來越多的人開始關注如何能做到疾病的精確診斷和治病。外泌體作為一個新型的研究熱點,由于它在體內存在的普遍性和獲取的便捷性,已經成為了疾病診斷治病的潛在有效方式,在精細醫學發展上有著光明的前景。多泡內體的腔內囊泡,要么分選進溶酶體將物質降解,要么作為外泌體分泌到胞外環境中。將膜分選到不同的腔內囊泡群中的機制尚不清楚。該研究發現物質被分選到內體膜上的不同子域中,并且外泌體相關結構域向內體腔的轉移不取決于ESCRT(運輸所需的內體分選復合體)的功能,但是需要鞘脂神經酰胺。純化的外體富含神經酰胺,并且在神經鞘磷脂酶被壓制后外泌體釋放減少。這些結果確定了內體內膜運輸和外泌體形成的途徑。廣州正規外泌體提取試劑哪里買