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來源: 發布時間:2022-01-09

鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化鉀 100 mL,用1 mol/L 氫氧化鈉調節酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構吸取膠原10μL至小培養皿中,倒入0.5 mL自組裝液,室溫放置20 min。予自組裝液自組裝24 h。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培養皿中,將自組裝24 h的膠原浸泡在戊二醛中。然后將膠原經去離子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10 mmol/L 二水氯化鈣+150 mmol/L氯化鈉+50 mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,滴入聚丙烯(PAA)至濃度350 μg/mL;滴加1 mol/L的氯化氫,調節酸堿度至7.4,然后緩慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氫二鈉),約16滴/min。鼠尾膠原醋酸溶解:不要晃動或攪拌。合肥成都鼠尾膠原

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鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養皿(實驗組)和普通培養皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態,應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態,流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。貴陽鼠尾膠原銷售廠家放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。

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鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調節pH = 6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀。

鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用; (2)凍干鼠尾腱經低溫凍干粉碎至200?400目; (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,期間不斷攪拌,防止凍結成塊,得到膠原溶脹液; (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,鼠尾腱與蛋白酶質量比為50: I?100: 1,在4°C,48?74小時酶解,期間間歇性攪拌。鼠尾膠原是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用。

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鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。3.稀釋一定數量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養瓶。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細胞前用無菌的水漂洗。結果無鼠尾膠原時,前庭毛細胞懸浮于外液,不宜封接。蘇州鼠尾膠原哪家好

將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用。合肥成都鼠尾膠原

鼠尾膠原是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時它也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬 片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。通 過本實驗可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾膠原將其固定于 培養瓶內。 實驗設備及材料: 大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理 鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。 實驗內容: 1、制備鼠尾膠原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。合肥成都鼠尾膠原

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