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來源: 發(fā)布時間:2022-01-16

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul 10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。蕪湖鼠尾膠原推薦廠家

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鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。結果與結論:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細胞存活率及細胞內過氧化氫活力明顯下降,細胞凋亡率及細胞內丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁。

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一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優(yōu)點:1、本發(fā)明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產效率, 同時避開了使用其他設備帶來的成本上升問題。2、本發(fā)明專利生產的止血材料(止血海綿),其動物實驗表明其具有非常好的止血效果。也可應用于內臟出血。具有廣闊的應用前景。3、本發(fā)明制備的止血材料具有可完全被人體吸收,與出血創(chuàng)面一接觸,其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血創(chuàng)面上,外面則形成連續(xù)的壓迫干層。啟動凝血因子。同時,聚乙烯醇為成膜材料,兩種的協同效應形成了一種理想的止血狀態(tài)和結構。

鼠尾膠原,是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進體外培養(yǎng)細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。有點學術了,聽不懂···貼壁,有什么意義?分散的單一細胞培養(yǎng)能夠比較理想地反映細胞的具體生物特性。選擇合適的培養(yǎng)基,可以解決培養(yǎng)中細胞脫落和細胞重聚的現象。鼠尾膠原,是一種細胞支持物,它是細胞外基質的主要成份,可直接或間接參與細胞的附著。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,純度達到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細胞前用無菌的水漂洗。

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具體實施方式實施例1 止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯合發(fā)揮作用的聚乙烯醇、殼聚糖作為輔料。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為 0.2% 0.2%。余量為水。2、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養(yǎng)小板,-40°C預凍池,再轉入_80°C超低溫冰箱急凍4h,再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥10h,即可以得到復合型凍干止血材料。Co60輻射滅菌,干燥保存。凍干的材料可直接用于各種傷口的止血。實施例2 止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯合發(fā)揮作用的聚乙烯醇、殼聚糖作為輔料。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5% 2% 1%,余量為水。2、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養(yǎng)板,-20°C預凍,再轉入_80°C超低溫冰箱急凍8h,再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥30h,即可以得到復合型凍干止血材料。Co60輻射滅菌,干燥保存。制備鼠尾膠原:按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液。濟南鼠尾膠原廠家

I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體。蕪湖鼠尾膠原推薦廠家

生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結構。蕪湖鼠尾膠原推薦廠家

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