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來源: 發布時間:2020-12-07

三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預冷 ):10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水A.不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。鼠尾型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。正規鼠尾膠原供應商

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使用方法:1、細胞培養器皿的表面包被:以包被濃度為2μg/cm2為例,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應的培養器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。2、三維膠原凝膠的制備:A、無細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養液,混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值)。將培養器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。合肥正規鼠尾膠原供應商鼠尾膠原醋酸溶解:稀釋一定數量的膠原溶液。

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鼠尾膠原,是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。有點學術了,聽不懂···貼壁,有什么意義?分散的單一細胞培養能夠比較理想地反映細胞的具體生物特性。選擇合適的培養基,可以解決培養中細胞脫落和細胞重聚的現象。鼠尾膠原,是一種細胞支持物,它是細胞外基質的主要成份,可直接或間接參與細胞的附著。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,純度達到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養皿的包被,特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養;也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環境中生長。

I型鼠尾膠原是借鑒Navneeta Rajan, Jason Habermehl法,經過乙酸抽提、離心、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度、高活性膠原蛋白,屬于醫藥級別產品,可用于包被細胞培養器皿(單分子層包被),適合多種類型細胞的貼壁如肝臟細胞、神經節細胞、胚胎細胞、肌細胞、肺細胞、神經鞘細胞等。I型膠原蛋白包被細胞培養板,規格為6/24孔板,表面經I型膠原蛋白包被,可以很好的降低蛋白質的吸附。使用這種細胞培養板培養細胞,可以獲得良好的細胞貼壁率,細胞增殖速度快,形態均一,細胞培養成功率高。鼠尾膠原蛋白用于生產明膠并添加到布丁和棉花糖中。

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鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用; (2)凍干鼠尾腱經低溫凍干粉碎至200?400目; (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,期間不斷攪拌,防止凍結成塊,得到膠原溶脹液; (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,鼠尾腱與蛋白酶質量比為50: I?100: 1,在4°C,48?74小時酶解,期間間歇性攪拌。制備鼠尾膠原(兩個同學一組操作)。廈門鼠尾膠原廠家推薦

鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜。正規鼠尾膠原供應商

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現代醫學的發展,各種醫用耗材的更新換代也是日新月異。止血材料是常見的醫療器械產品。但是現今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點;同時還存在著容易與傷口粘附不易去除,導致傷口潰爛,或者因為粘附導致傳染;再次就是止血材料多是通過吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質的材料來生產的。現今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素、α -氰基丙烯酸酯類組織膠、醫用止血明膠等,但是都有各自的缺點。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高;α -氰基丙烯酸酯類組織膠降解過程中釋放出氰和甲醛等有毒物質;醫用止血明膠黏附性較差,易脫落,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等。正規鼠尾膠原供應商

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