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膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

來源: 發布時間:2023-05-21

以MS培養基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。孟德爾-韋伯利法可以計算培養基的可利用能量。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

培養基

長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時,常需在培養基中加入少量螯合劑,避免培養基中產生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養基pH會發生改變(一般使pH降低),可根據所培養微生物的要求,在培養基滅菌前后加以調整。BCG牛乳培養基LB培養基是普遍使用的通用培養基,適用于大多數腸道菌和非腸道菌的培養。

膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL),培養基

要獲得微生物純培養,必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。

培養基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據培養基的組成成分,可分為天然培養基和合成培養基兩大類。天然培養基(native medium) 含有不完全明了化學成分的天然物質。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養基很難做到不同批號之間質量的穩定一致,因此在選用原料時務必注明其商品名稱、生產廠家及批號,對不同來源的原料應先做小樣試驗。此種培養基成本較低,細菌繁殖較好,一般細菌培養以選用天然培養基為主。細胞類培養基則可分為無血清培養基和含血清培養基兩類。

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按培養基的營養成分是否完全區分:1.基本培養基,亦稱“較低限度培養基”。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養基,稱為基本培養基,是含有營養要求較低成分的合成培養基,常用“[-]”表示。這種培養基往往缺少某些生長因子,所以經過誘變過的營養缺陷型菌株不能生長。2.完全培養基,基礎培養基添加血清等物質后,叫完全培養基,也叫(血清)細胞培養基。完全培養基可用來滿足微生物的各種營養缺陷型菌株的生長需要,常以“[+]”表示。3.補充培養基,凡是只能滿足相應的營養缺陷型生長需要的組合培養基,稱為補充培養基,它是在基本培養基中加入該菌株不能合成的營養因子而組成的。根據在基本培養基中加入的是A或B等營養因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。細菌類培養基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基、麥芽瓊脂培養基等等。BCG牛乳培養基

常見的培養基有LB培養基,YPD培養基,M9培養基和DMEM培養基等。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

細胞培養過程中,細胞培養基是不可或缺的,細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養細胞生長和繁殖的生存環境。通常細胞體外培養時需要加入血清,以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細胞在培養過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據細胞類型判斷。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

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