培養基制備的九個步驟關注要點:步驟一:稱取數量:用1/100的電子天平稱出培養基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應培養基需要各成分的數量,然后用電子天平準確稱取重量。步驟二:培養基溶化:將培養基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養基中不含瓊脂,則不需要對培養基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三:調培養基pH:雖然培養基中含有緩沖物質,可以盡量使培養基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。步驟四:培養基過濾:如果對配制的培養基沒有特殊要求,這一步可以省略。步驟五:培養基分裝:準備好的培養基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。確定這批培養基的較終pH值。步驟六:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。基礎培養基:含有細菌生長繁殖所需的基本營養物質,可供大多數細菌生長。遼寧培養基制備儀廠家
消毒與滅菌的區別:消毒指使用較為溫和的物理或化學方法單殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。進口培養基制備儀報價培養平板培養基是被用于獲得微生物純培養的很常用的固體培養基形式。
高壓滅菌造成培養基結焦焦化問題:在實驗過程中,檢測人員發現在高壓滅菌后的培養基有結焦焦化現象。微生物認為造成這種現象是:控制培養基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養基在高溫環境中不要長時間存放。以上原因都會導致培養基結焦焦化。貯存:培養基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。
培養基的類型:1、根據對培養基組成物質的化學成分是否完全了解來區分,可以將培養基分為天然培養基、合成培養基和半合成培養基。(1)天然培養基:天然培養基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質配成的培養基雖然不能確切知道它的化學成分,但一般來講,營養是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實驗室常用的培養基。這種培養基的穩定性常受生產廠或批號等因素的影響。(2)合成培養基合成培養基是一類化學成分和數量完全知道的培養基,它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。這類培養基化學成分精確、重復性強,但價格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學研究,例如營養、代謝的研究。(3)半合成培養基。為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養物,培養基必須及時嚴格滅菌。
培養基的性能測試:1.外觀控制:制備好的培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。2.污染控制:從每批制備好的培養基中選取部分進行污染測試(無菌試驗),確定無微生物生長方可使用。3.性能測試:(1)測試菌株選擇:測試菌株是具有其表示種的穩定特性并能有效證明實驗室特定培養基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測試方法(改進的劃線法接種法)。(4)定性測試方法(平板接種觀察法)。用接種環取測試菌培養物,在測試培養基表面劃平行直線。液體培養基是培養基物理分類一種,是相對固體培養基而言的,是微生物或動植物細胞的液狀培養基。遼寧培養基制備儀廠家
液體培養基在靜止的條件下,在菌體或培養細胞的周圍,形成透過養分的壁障,養分的攝入受到阻礙。遼寧培養基制備儀廠家
殺毒滅菌方式主要有三種類型:⑴高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數耐熱培養基。⑵煮沸滅菌法方式:此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。⑶過濾除菌方式:過濾除菌,采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。培養基倒入平板:將滅菌溶化的培養基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養皿中。微生物培養基制備的溫度不能太高,否則培養皿內蓋容易形成過多的冷凝水。遼寧培養基制備儀廠家
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