培養基的制備原則和要求:培養基是根據各類微生物生長繁殖的需要,用人工方法把多種物質混合而成的營養物。一般用來分離、培養菌類。常用的培養基有基礎培養基、增菌培養基、選擇培養基、鑒別培養基和厭氧培養基。在制備培養基時,應掌握如下原則和要求:(一)培養基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養物質。所用的化學藥品必須純凈,稱取的份量務必準確。(二)培養基的酸堿度應符合細菌生長要求。按各種培養基要求準確測定調節pH值。多數細菌生長的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。培養基制備器全自動控制程序,確保內部溫度均一。湖南自動培養基制備器
在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過滅菌等準備就緒后,才能使用。新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業鹽酸中數小時,使游離的堿性物質除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸,數分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。湖南大容量 培養基制備器培養基配好后不宜久置,很好現配現用。
血清培養基主要問題:血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌有毒的等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。動物個體不同,血清產地、批號不同,每批質量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響,可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。大規模生產中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。
實驗室在制作培養基時候的經驗總結:1、培養基pH值的調正:pH因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的較終pH,保證培養基的質量。pH調整后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。2、培養基過濾澄清:液體培養基必須澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。平板培養基要除去冷凝水,否則將影響平板分離培養效果。
培養基制備的基本方法和注意事項:1、培養基配方的選定:同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養基的制備記錄:每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。配制培養基的原則:根據培養目的需要選擇適宜的營養物質。中國臺灣培養基制備器供應商
培養基制備器小倒管浸滿培養基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。湖南自動培養基制備器
培養基制備的九個步驟關注要點:步驟一:稱取數量:用1/100的電子天平稱出培養基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應培養基需要各成分的數量,然后用電子天平準確稱取重量。步驟二:培養基溶化:將培養基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養基中不含瓊脂,則不需要對培養基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三:調培養基pH:雖然培養基中含有緩沖物質,可以盡量使培養基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。步驟四:培養基過濾:如果對配制的培養基沒有特殊要求,這一步可以省略。步驟五:培養基分裝:準備好的培養基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。確定這批培養基的較終pH值。步驟六:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。湖南自動培養基制備器