培養基的類別按照培養基的成分來分:培養基按其所含成分,可分為合成培養基、天然培養基和半合成培養基三類。(1)合成培養基。合成培養基的各種成分完全是己知的各種化學物質。這種培養基的化學成分清楚,組成成分精確,重復性強,但價格較貴,而且微生物在這類培養基中生長較慢。如高氏一號合成培養基、察氏培養基等。(2)天然培養基。由天然物質制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養霉菌,后者用于培養細菌。這類培養基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養豐富,所以常被采用。(3)半合成培養基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養基的基礎上添加某些天然成分,如培養霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基。這類培養基能更有效地滿足微生物對營養物質的需要。培養基制備器滅菌鍋關閉放氣閥前,將鍋內氣體排干凈。中國澳門瓊脂滅菌 培養基制備器
自動培養基制備分裝器是一種用于農學領域的分析儀器:可制備從1升到10升的培養基。高效電加熱器,方便腔體的清洗。自帶磁力攪拌裝置,每分鐘50-200轉可調。溫度控制范圍:70℃到122℃。微處理器控制溫度精度為0.1度,顯示溫度精度0.1度。機器有培養基滅菌模式、巧克力平板模式、水浴鍋模式及高壓鍋模式。具有壓力維持系統。分裝機很大一次性載裝量為540個皿,分裝體積1-99ml可選,分裝精度1%,分裝速度不低于900塊/小時,分裝量不低于500毫升/分鐘。能自動調整適應公差范圍內的平皿。分裝主機具有變徑功能。通過選配件可快速轉換為全自動試管分裝系統。可以自動識別并跳過不符合分裝的平皿,不影響整機分裝過程的連續性。低速,普通,震動平鋪三種分裝模式。自帶2個RS232接口。具有自帶清洗程序。分裝系統可編程操作16個程序。分裝流速0.6mL/min-5L/min,分裝誤差小于1%。可設置多種工作方式,單次分裝量0.1mL-9999mL。可設置為間隔分裝,暫停時間0.1-10秒可選,并可設定分裝次數。中國澳門瓊脂滅菌 培養基制備器培養基制備器培養基分裝機**系統,程度上方便用戶的使用。
培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。
微生物檢驗培養基制備的要點:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數耐熱培養基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當中'海培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。培養基制備器殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。
三角培養瓶是細胞培養中的常用耗材,也可用于培養基的配制、混合及儲存。利用三角培養瓶制備培養基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養瓶:若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角培養瓶,很多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。培養基制備器蓋子和分裝孔是采用溫度和壓力控制的,不能隨意打開。中國澳門瓊脂滅菌 培養基制備器
全自動培養基制備儀主要特點:不會產生氣泡。中國澳門瓊脂滅菌 培養基制備器
消毒與滅菌的區別:消毒指使用較為溫和的物理或化學方法單殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。中國澳門瓊脂滅菌 培養基制備器