培養基的制備:正確制備培養基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數據,如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節信息,如;培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。單獨排水通道設計有效防止冷凝水殘留污染介質。 支持遠程監控功能,便于多實驗室協同管理。遼寧不銹鋼內桶培養基制備器
培養基的質量測試:每批培養基制備好以后,應仔細檢查一遍,如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。并測定其較終pH.將全部培養基放入36±1°C恒溫箱培養過夜,如發現有菌生長,即棄去。用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基,培養24~48小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養基即應棄去,不能使用。培養基的保存:培養基應存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制備記錄副頁或明顯標簽。中國香港培養基制備器供應商選購時需結合樣本量、成分敏感性及預算,優先選擇控溫精確、升/降溫速度快且具備無菌保護設計的設備。
制備培養基的操作要點:a.液體培養基所配制的培養基是液態的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養基營養成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態。b.固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂為常用。固體培養基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。c.半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。
配置培養基注意問題:1、根據不同微生物的營養需要配制不同的培養基。2、注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。3、將培養基的pH控制在適宜的范圍之內,以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。4、要注意各種原料的配比,每種培養基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。5、如需要加熱的時候注意時間的把握。培養基,是指供給微生物、植物或動物生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。快速冷卻減少培養基暴露于環境的時間,避免空氣中微生物污染。
微生物檢驗培養基制備的要點:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數耐熱培養基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當中'海培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。在選購培養基制備器時,快速加熱和冷卻能力是重要考量因素,直接影響培養基的質量、實驗效率及操作便利性。貴州瓊脂培養基 培養基制備器
培養基中的維生素、生長因子等易受高溫破壞,高效加熱縮短熱暴露時間,減少降解。遼寧不銹鋼內桶培養基制備器
實驗室在制作培養基時候的經驗總結:1、培養基pH值的調正:pH因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的較終pH,保證培養基的質量。pH調整后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。2、培養基過濾澄清:液體培養基必須澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。遼寧不銹鋼內桶培養基制備器