利用三角培養瓶制備培養基:包扎,分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。滅菌,按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。擺斜面,滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。貯存,培養基在30℃下放置,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養基是細胞生長的必需營養物質,利用三角培養瓶制備培養基可按照以上步驟操作,在使用前需確保培養基的無菌性,以免影響細胞正常繁殖。實時監測壓力與溫度參數,保障滅菌過程合規性。 高效冷凝系統縮短冷卻時間,提升整體制備效率。江西瓊脂滅菌 培養基制備器
實驗室在制作培養基時候的經驗總結:1、培養基成份稱量:培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。2、培養基成份的混合與溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置于高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。全自動培養基制備器安裝調試Systec培養基制備器采用模塊化設計,適配多種培養基類型需求。
制作牛肉膏蛋白胨固體培養基:(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過菌的培養皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養基的錐形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養基(約10~20mL)倒入培養皿,左手立即蓋上培養皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。
血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理:血清中沉淀物的出現有許多種原因,但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質量。若想去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。何謂熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和啟動。投資一臺高性能制備器可明顯降低實驗失敗率,長期節省時間和成本。
培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。需具備±1°C以內的精確控溫,避免溫度波動影響滅菌效果或成分穩定性。北京培養基制備器供應商
培養基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁!江西瓊脂滅菌 培養基制備器
培養基的滅菌:一般培養基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基制備方法中,如無特殊規定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20%或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應以無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50°C左右的培養基中。瓊脂斜面培養基應在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時,擺置成適當斜面,待其自然凝固。江西瓊脂滅菌 培養基制備器