制備培養(yǎng)基的小技巧1.培養(yǎng)基可按制備也可使用按生產(chǎn)的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基,脫水培養(yǎng)基除附有和使用說明外還應(yīng)注明有效期、貯存條件、適用性試驗的質(zhì)控菌株和用途。配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作,受潮結(jié)塊不能使用,以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。2.配制培養(yǎng)基使用的容器應(yīng)是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養(yǎng)皿等。使用的器皿應(yīng)洗凈,用蒸餾水沖凈,烘干后方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器,避免金屬離子與培養(yǎng)基成分結(jié)合,生成有害物質(zhì),影響細菌生長。**兼容外接冷卻**:如支持冷水浴槽或快速轉(zhuǎn)移至冷卻模塊。吉林培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的類型:1.合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。這類培養(yǎng)基化學(xué)成分精確、重復(fù)性強,但價格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學(xué)研究,例如營養(yǎng)、代謝的研究。2.半合成培養(yǎng)基在合成培養(yǎng)基中,加入某種或幾種天然成分;或者在天然培養(yǎng)基中,加入一種或幾種已知成分的化學(xué)藥品即成半合成培養(yǎng)基。例如馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基等。這種培養(yǎng)基在生產(chǎn)實踐和實驗室中使用較多。寧夏培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器適用于微生物學(xué)、制藥及食品檢測領(lǐng)域培養(yǎng)基制備。 精確pH值調(diào)控功能確保培養(yǎng)基化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定性。
血清培養(yǎng)基主要問題:血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌有毒的等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。動物個體不同,血清產(chǎn)地、批號不同,每批質(zhì)量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產(chǎn)生潛在影響,可能導(dǎo)致實驗失敗或?qū)嶒灲Y(jié)果不可靠性。大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構(gòu)成動物細胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。
培養(yǎng)基的配制:分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4~5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4ml,約試管的1/5高度。包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面:滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:具有快速升溫和迅速冷卻功能!
培養(yǎng)基的重要性:培養(yǎng)基的質(zhì)量是微生物實驗室檢測工作的基礎(chǔ),事關(guān)檢測工作的準確性、可靠性,在微生物實驗室檢測工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個環(huán)節(jié)的質(zhì)量問題,都將導(dǎo)致檢驗結(jié)果科學(xué)性、客觀性的偏離。因此,加強培養(yǎng)基的實驗室質(zhì)量控制,認真地做好培養(yǎng)基的質(zhì)控工作,不斷完善和提高培養(yǎng)基的質(zhì)控水平,才能為微生物檢測實驗室提供高質(zhì)量的培養(yǎng)基。滅菌,一般培養(yǎng)基采用濕熱滅菌,即高壓蒸汽滅菌。第五,pH測定,微生物必須在適宜的pH范圍內(nèi)才能正常生長繁殖或體現(xiàn)其生物特性。投資一臺高性能制備器可明顯降低實驗失敗率,長期節(jié)省時間和成本。寧夏培養(yǎng)基制備器
**蒸汽加熱**(高壓滅菌鍋):需關(guān)注蒸汽生成速度及均勻性。吉林培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的過濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內(nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。吉林培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器