培養(yǎng)基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、素、色素、和血清等)等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:具有快速升溫和迅速冷卻功能!安徽瓊脂培養(yǎng)基制備器
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時,要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時左手食指與姆指稍稍緊握,就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后,應迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內(nèi)或瓶內(nèi),上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札,準備滅菌。安徽瓊脂培養(yǎng)基制備器觸控界面簡化操作步驟,減少人工干預誤差風險。
如何避免沉淀物的產(chǎn)生:在使用血清的時候,注意下列的操作:①解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),非常容易產(chǎn)生沉淀物。②解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。③勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。⑤若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,當培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。但KH2PO4和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍內(nèi)(6.4-7.2)起調(diào)節(jié)作用。有些微生物,如乳酸菌能大量產(chǎn)酸,上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用,此時可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來進行調(diào)節(jié),CaCO3難溶于水,不會使培養(yǎng)基pH過度升高,但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸,同時釋放出CO2,將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內(nèi)。在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng),如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)都屬于兩性電解質(zhì),也可起到緩沖劑的作用。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。
培養(yǎng)基的性能測試:1.外觀控制:制備好的培養(yǎng)基應有相應的顏色,一般的培養(yǎng)基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化,是否蒸發(fā)/脫水。2.污染控制:從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進行污染測試(無菌試驗),確定無微生物生長方可使用。3.性能測試:(1)測試菌株選擇:測試菌株是具有其表示種的穩(wěn)定特性并能有效證明實驗室特定培養(yǎng)基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測試方法(改進的劃線法接種法)。(4)定性測試方法(平板接種觀察法)。用接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物,在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線。培養(yǎng)基制備器負載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生!安徽瓊脂培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加.安徽瓊脂培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的很適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。安徽瓊脂培養(yǎng)基制備器