殺毒滅菌方式主要有三種類型：⑴高壓蒸汽滅菌方式，此方法可用于大多數耐熱培養基。⑵煮沸滅菌法方式：此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。⑶過濾除菌方式：過濾除菌，采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。培養基倒入平板：將滅菌溶化的培養基冷卻至五十度后，倒入無菌干燥的培養皿中。微生物培養基制備的溫度不能太高，否則培養皿內蓋容易形成過多的冷凝水。全自動培養基制備儀主要特點：具有快速升溫和迅速冷卻功能!山東自動攪拌培養基制備器

在制備培養基時，通常要考慮以下因素：1.緩沖能力碳算鹽緩沖系統由于毒性小、成本低、對培養物有營養作用，因此比其他緩沖系統用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。2.滲透壓多數培養細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍，一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養基，可通過測定滲透壓防止3.粘度培養基的粘度主要受血清含量的影響，在多數情況下，對細胞生長沒有什么影響。在攪拌條件下，用羧甲基纖維素增加培養基的粘度，可減輕細胞損害。這對在低血清濃度或無血清下條件下培養細胞顯得尤為重要。自動攪拌培養基制備器廠家培養基制備器解凍血清時，請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)!

溶化：培養基放入燒杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養基中不含有瓊脂，培養基不需要加熱；如果含有瓊脂，則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸，完全溶解后，再補齊所需水，并攪拌均勻。如果配置的培養基量很大，可用不銹鋼鍋加熱溶化，可先用溫水加熱并隨時攪動，防止焦化，如有焦化現象，配制的培養基就不能使用，要重新配制。配制培養基時不可用銅或鐵的容器溶化，因銅或鐵制容器可能會使培養基中的銅和鐵的含量超標，影響實驗（培養基中銅含量大于0.3mg/L，細菌不宜生長，鐵含量超過0.14mg/L，妨礙細菌產有害）。對容易發生反應，產生沉淀的藥品，要分開溶解，較后加入培養基，如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。

培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化．也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動，以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用，應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。如為瓊脂培養基，應先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發而丟失的水分，較后必須加以補足。培養基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁.

固體斜面培養基配制步驟：1、培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規定進行配制外，一般均應盡量收集有關資料，加以比較核對，再依據自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2、培養基的制備記錄：每次制備培養基均應有記錄，包括培養基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等，記錄應復制一份，原記錄保存備查，復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。3、培養基成分的稱取：培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，較好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。**大規模生產**：優先考慮工業化滅菌釜（如**Systec高壓滅菌器**）或連續流培養基制備系統。自動攪拌培養基制備器廠家

**蒸汽加熱**（高壓滅菌鍋）：需關注蒸汽生成速度及均勻性。山東自動攪拌培養基制備器

培養基配制：配制用水，培養基的大部分是水，所以水的質量直接影響培養基的質量。按Waymouth標準，水的電阻應為200萬歐姆，一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養基：培養基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調pH至7.2-7.4，若pH值超過7.6或遠低于6.8，則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清：培養中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制，可選用無血清培養基。山東自動攪拌培養基制備器