微生物檢驗培養基制備的要點:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數耐熱培養基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當中'海培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。低能耗技術降低運行成本,符合實驗室可持續發展要求。 多級安全保護機制預防設備過載或異常操作風險。山西不銹鋼內桶培養基制備器
簡單制作培養基,需調整培養基成分,介質中使用的化學物質應該是化學純品,銅鍋或鐵鍋易導致銅、鐵混入培養基,使細菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋子,可用溫水加熱,隨時攪拌,防止結焦。若發現結焦,則不能使用介質,需重新調配。在溶解大多數固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡單制作培養基,需調整培養基的pH值,由于加熱消毒過程中培養基的pH值會發生變化,因此應在培養基組分完全溶解后,調整pH值。舉例來說,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經驗,掌握培養基的很終pH值,保證培養基的質量。在調整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養基沉淀。中國澳門培養基制備器哪家好快速升溫至目標溫度(如121°C)可確保徹底殺滅微生物(包括耐熱芽孢),避免因升溫慢導致滅菌不徹底。
三角培養瓶是細胞培養中的常用耗材,也可用于培養基的配制、混合及儲存。利用三角培養瓶制備培養基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養瓶:若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角培養瓶,很多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。
簡單制作培養基,需要完成以下幾個主要步驟:需要選擇培養基配方,同一種培養基,其表達方式往往存在著差異。所以,除了應當嚴格按照標準方法的規定編制之外,我們一般應盡可能收集有關數據,加以比較和核對,然后根據自己的目的選擇和記錄數據來源。需記錄培養基的制備,培養基的制備記錄包括培養基的名稱、配方及其來源、pH值、滅菌溫度、時間、配制日期、制備人等,并且要復印記錄和保存原始記錄備查。對副本的記錄應該和培養基一起保存,以防出現混亂。需稱重培養基的成分,培養基成分要準確稱量,并注意防止混淆。每一種成分稱量完畢后,都要在分裝的一面打上記號,然后將分裝的藥物一起放在左邊。每一個成分稱量完之后,都會向右移動。全部稱量完畢,應再次檢查。理想設備應在10~15分鐘內達到121°C(如高壓滅菌鍋)或快速溶解瓊脂(如帶攪拌的培養基制備儀)。
微生物限度:細胞培養基不是無菌產品,其中的微生物在一定條件下會吸收細胞培養基中的營養物質滋生繁殖,導致細胞培養基變質失效。控制細胞培養基中細菌和霉菌,是延長細胞培養基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華人民當地藥典》2005版二部附錄第100頁的口服給藥制劑的微生物限度標準,并嚴于該標準,規定細胞培養基產品的細菌數每1g不得超過200個,霉菌數每1g不得超過50個。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,混勻即得試樣。按中華人民當地藥典2005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進行,檢查項目為細菌數、霉菌數。檢查法采用平皿法。**小規模實驗室**:選擇帶高效加熱/冷卻功能的臺式培養基制備儀。山西不銹鋼內桶培養基制備器
液體溢出報警需檢查容器裝載量是否超標。山西不銹鋼內桶培養基制備器
天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。常用的天然有機營養物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養基成本較低,除在實驗室經常使用外,也適于用來進行工業上大規模的微生物發酵生產。組合培養基合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如,高氏1號培養基和查氏培養基等。合成培養基有一定的配方,配制合成培養基時重復性強,但與天然培養基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。半組合培養基指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養基。山西不銹鋼內桶培養基制備器