馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過(guò)程：(1)稱量和熬煮：按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持20-30min，用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾，濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解：把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉網(wǎng)上，小火加熱，并用玻棒不斷攪拌，以防瓊脂糊底或溢出，待瓊脂完全溶解后，再補(bǔ)充水分至所需量。(3)分裝：按實(shí)訓(xùn)要求，將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量：固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5，滅菌后制成斜面，分裝入三角瓶?jī)?nèi)以不超過(guò)其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。(4)加棉塞：培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等)，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染，并保證有良好的通氣性能。縮短冷卻時(shí)間可加速后續(xù)分裝、倒平板等操作。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器品牌

滅菌：分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。滅菌的方法種類如下：1.高壓蒸汽滅菌法:大多數(shù)熱培養(yǎng)基都可用此法，小量分裝時(shí)，用121℃、15min；滅菌量大時(shí)，用121℃、30min滅菌；含糖類的培養(yǎng)基只能113℃~115℃、15min滅菌，避免糖類遭破壞。2.煮沸滅菌:對(duì)含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基，可使用此方法。3.過(guò)濾除菌:以過(guò)濾的方法除菌，用無(wú)菌操作技術(shù)，定量加入培養(yǎng)基。血液、物品可用無(wú)菌操作技術(shù)抽取，加入冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基含有不耐熱的物質(zhì)時(shí)，可用此法。河南自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器解凍血清時(shí),請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)!

培養(yǎng)基的購(gòu)置：從培養(yǎng)基自身的質(zhì)量來(lái)看，不同生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品，甚至同一廠家不同批號(hào)的產(chǎn)品都會(huì)存在差異。對(duì)培養(yǎng)基的供應(yīng)企業(yè)進(jìn)行評(píng)價(jià)后選擇合格的供應(yīng)商，這是培養(yǎng)基購(gòu)買過(guò)程中重要的步驟。應(yīng)選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)度高、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè);企業(yè)是否通過(guò)了質(zhì)量管理體系的認(rèn)證是較為客觀的評(píng)價(jià)指標(biāo)。要求生產(chǎn)企業(yè)提供：培養(yǎng)基成分名稱及產(chǎn)品編號(hào)、批號(hào)、使用前的pH、儲(chǔ)藏信息和有效期、性能評(píng)價(jià)和所用測(cè)試菌株、技術(shù)數(shù)據(jù)清單、質(zhì)控證書以及必要的安全/危害數(shù)據(jù)等材料。

培養(yǎng)基防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：確認(rèn)工作細(xì)胞庫(kù)是否被污染，確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染，確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用細(xì)菌、病菌及支原體無(wú)菌試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時(shí)即可觀察有無(wú)污染。其它：高壓滅菌設(shè)備、過(guò)濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證，后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次)。另外，應(yīng)將有毒區(qū)與無(wú)毒區(qū)嚴(yán)格分開(kāi)，并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室，有毒區(qū)對(duì)無(wú)毒區(qū)應(yīng)保持相對(duì)負(fù)壓，防止病毒對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫(kù))的污染。在選購(gòu)培養(yǎng)基制備器時(shí)，快速加熱和冷卻能力是重要考量因素，直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量、實(shí)驗(yàn)效率及操作便利性。

在制備培養(yǎng)基時(shí)，通常要考慮以下因素：(1)pH值多數(shù)細(xì)胞系在pH=7.4下生長(zhǎng)得很好。盡管各細(xì)胞株之間細(xì)胞生長(zhǎng)*pH值變化很小，但一些正常的成纖維細(xì)胞系以pH=7.4～7.7，轉(zhuǎn)化細(xì)胞以pH=7.0～7.4更合適。據(jù)報(bào)道，上皮細(xì)胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值，做一個(gè)簡(jiǎn)單的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)或特殊功能分析酚紅常用作指示劑，pH=7.4呈紅色，pH=7.0變橙色，pH=6.5變黃色，而pH=7.6呈紅色中略帶藍(lán)色，pH=7.8呈紫色。由于對(duì)顏色的觀察有很大的主觀性，因而必須用無(wú)菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標(biāo)準(zhǔn)樣，放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對(duì)培養(yǎng)物有營(yíng)養(yǎng)作用，因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有很寬的耐受范圍，一般常用冰點(diǎn)降低或蒸汽壓升高測(cè)定。如果自己配培養(yǎng)基，可通過(guò)測(cè)定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：溫度探頭測(cè)量培養(yǎng)基實(shí)際溫度。山東培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)

培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽.培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器品牌

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn)：培養(yǎng)基倒入平板，將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后，倒入無(wú)菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高，否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過(guò)多的冷凝水；溫度太低，中海培養(yǎng)基容易凝固成塊狀，不能做成平板。倒平板時(shí)，要靠近酒精的火焰以防止外來(lái)細(xì)菌落入盤中。左手托住培養(yǎng)皿，右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出錐形瓶的棉塞，燒灼燒瓶口，用拇指和食指在培養(yǎng)皿蓋上打開(kāi)一條縫，直到燒瓶口剛好伸手進(jìn)去，倒入培養(yǎng)基，直到底部被覆蓋。不要超過(guò)培養(yǎng)皿高度的三分之一，迅速蓋上蓋子，放在桌子上，輕輕旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基分布均勻，凝結(jié)后即可。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器品牌