重組Exendin-4是一種基于Exendin-4的重組蛋白，Exendin-4是一種從墨西哥蜥蜴（Gilamonster）的毒液中分離出來(lái)的39個(gè)氨基酸的多肽。它與胰高的血糖素樣肽-1（GLP-1）具有53%的序列同源性，并與相同的膜受體相互作用。重組Exendin-4在體內(nèi)增強(qiáng)依賴(lài)葡萄糖的胰島素分泌，抑制不適當(dāng)?shù)母咭雀叩难撬胤置?，并減慢胃排空。它還在體外和動(dòng)物模型中促進(jìn)β細(xì)胞增殖和新生。重組Exendin-4是通過(guò)大腸桿菌表達(dá)的合成DNA序列編碼的39個(gè)氨基酸的Exendin-4。重組Exendin-4的特點(diǎn)包括：-分子量約為4.2kDa，是一個(gè)非糖基化的單一多肽鏈，包含39個(gè)氨基酸。-具有調(diào)節(jié)血糖水平、減少胰島素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血紅蛋白（HbA1c）和刺激β細(xì)胞生長(zhǎng)以促進(jìn)胰島素產(chǎn)生等多種生物活性。-通常以凍干粉的形式提供，需要在無(wú)菌條件下用無(wú)菌蒸餾水或含有0.1%BSA的水溶液復(fù)溶。-純度高于96%，通過(guò)SDS-PAGE和HPLC分析確定。-內(nèi)毒的素含量低于10EU/mg，通過(guò)LAL方法測(cè)定。在實(shí)驗(yàn)中，可以通過(guò)以下方法來(lái)優(yōu)化重組Exendin-4的熒光特性：1.選擇合適的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)。2.優(yōu)化激發(fā)和發(fā)射濾光片。3.評(píng)估熒光量子產(chǎn)率。4.調(diào)整緩沖液條件，包括pH值和離子強(qiáng)度。5.控制溫度和氧濃度。TBE (Thymine base editor)：這是一種新型的堿基編輯工具，不依賴(lài)脫氨酶，能夠通過(guò)人源化尿嘧啶DNA-糖基化酶。Recombinant Human CD79B(His-Avi Tag)

重組人血清白蛋白（rHSA）是通過(guò)植物表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)產(chǎn)品，在科研領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。以下是rHSA在科研中的一些主要應(yīng)用：1.**細(xì)胞培養(yǎng)**：rHSA是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要成分，它可以作為血清替代品，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和維持細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性。由于其無(wú)動(dòng)物源成分，可以減少血清中可能存在的病毒污染風(fēng)險(xiǎn)，適用于需要高生物安全性的細(xì)胞培養(yǎng)研究。2.**藥物載體**：rHSA因其良好的生物相容性和藥物結(jié)合能力，被用作藥物載體，有助于提高藥物的穩(wěn)定性、延長(zhǎng)藥物的半衰期，并可能改善藥物的靶向性。3.**疫苗保護(hù)劑**：在疫苗開(kāi)發(fā)中，rHSA可以用作保護(hù)劑，有助于提高疫苗的穩(wěn)定性和有效性。4.**細(xì)胞凍存保護(hù)劑**：rHSA在細(xì)胞凍存過(guò)程中起到保護(hù)作用，有助于提高細(xì)胞復(fù)蘇后的存活率。5.**醫(yī)療器械包埋劑**：在醫(yī)療器械領(lǐng)域，rHSA可以作為包埋劑，用于藥物洗脫支架或其他植入式醫(yī)療設(shè)備。6.**生物制藥**：rHSA在生物制藥生產(chǎn)中作為穩(wěn)定劑和保護(hù)劑，有助于提高蛋白質(zhì)藥物的穩(wěn)定性和療效。7.**基因**：在基因領(lǐng)域，rHSA可能被用作基因載體，幫助基因傳遞至目標(biāo)細(xì)胞。8.**化妝品添加劑**：在化妝品行業(yè)，rHSA可能因其保濕和修復(fù)特性而被用作添加劑。DL3000Phusion DNA Polymerase 應(yīng)在后面加入反應(yīng)體系中，以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。

EndoS糖苷內(nèi)切酶S在抗體藥物偶聯(lián)物（ADCs）研究中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在糖鏈定點(diǎn)偶聯(lián)技術(shù)上。通過(guò)上海藥物所的研究，開(kāi)發(fā)了一種新穎的糖鏈定點(diǎn)ADC制備策略，利用EndoS2這種糖苷內(nèi)切酶，可以將小分子細(xì)胞毒藥物“一步”定點(diǎn)連接到抗體的糖基化位點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了糖鏈定點(diǎn)ADC化合物的制備。定點(diǎn)偶聯(lián)技術(shù)相比傳統(tǒng)的隨機(jī)偶聯(lián)具有更好的方法指數(shù)，能夠提高ADC的均一性和穩(wěn)定性，是當(dāng)前ADC領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。在抗體的Fc結(jié)構(gòu)域N297位，這是一個(gè)保守的糖基化位點(diǎn)，通過(guò)在該位點(diǎn)引入細(xì)胞物質(zhì)，可以形成具有優(yōu)勢(shì)的糖鏈定點(diǎn)ADC化合物（glycosite-specificADCs,gsADCs）。此外，EndoS2對(duì)多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性，能夠高效獲得功能修飾的糖工程抗體，并且可以用于抗體的內(nèi)吞成像研究及糖鏈延伸等功能化研究。研究人員通過(guò)這種“一步”制備策略得到的糖鏈定點(diǎn)ADC化合物，在結(jié)構(gòu)均一性、親水性、體外穩(wěn)定性以及體外活性方面表現(xiàn)良好，并且在體內(nèi)瘤抑制活性方面，相比陽(yáng)性對(duì)照ADC化合物，在低載藥量的情況下具有更強(qiáng)的抑制效果。EndoS酶的這些應(yīng)用，不僅展示了其在簡(jiǎn)化ADC制備流程中的潛力，還有助于推動(dòng)定點(diǎn)ADC藥物的深入發(fā)展，為未來(lái)的生物藥物開(kāi)發(fā)提供了新的思路和方法。

PreScissionProtease（PSP）是一種在蛋白質(zhì)純化和分析中使用的酶，具有以下特點(diǎn)：1.**特異性識(shí)別**：PSP能在低溫（4°C）下特異性識(shí)別八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro，并在Gln和Gly之間進(jìn)行酶切。2.**應(yīng)用**：PSP常用于去除融合蛋白中的GlutathioneS-transferase(GST)、His等標(biāo)簽，有助于純化目的蛋白。3.**純度高**：PSP的純度達(dá)到95%以上，確保了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。4.**穩(wěn)定性好**：PSP在含有50%甘油的儲(chǔ)存緩沖液中，-80℃長(zhǎng)期儲(chǔ)存，有效期2年；小量分裝-20℃保存，有效期6個(gè)月。5.**酶活定義**：在5℃條件下反應(yīng)16小時(shí)，能夠切割100μg的GST標(biāo)簽蛋白達(dá)90%以上所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。6.**兼容性強(qiáng)**：PSP的酶切體系中可以兼容1%TritonX-100、Tween-20或NP-40，10mMEDTA和500mMNaCl。7.**注意事項(xiàng)**：某些化合物如100mMZnCl2、4mMAEBSF和100μMChymostatin會(huì)抑制PSP的酶活性50%以上。8.**優(yōu)化酶切效率**：建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索實(shí)驗(yàn)濃度，實(shí)際操作中，建議酶用量1:25-1:100U/μg融合蛋白。激發(fā)的泛素被轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2的活性位點(diǎn)半胱氨酸殘基上，形成E2-泛素硫酯中間體。

檢測(cè)重組EGFP（增強(qiáng)型綠色熒光蛋白）的活性和穩(wěn)定性通常涉及一系列生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法。以下是一些常用的檢測(cè)方法：1.**SDS-PAGE電泳**：-通過(guò)SDS-PAGE電泳分析EGFP的純度和分子量。-觀察是否有蛋白質(zhì)降解或聚合的跡象。2.**WesternBlot**：-使用特異性的GFP抗體進(jìn)行Westernblot，以檢測(cè)EGFP蛋白的存在和大小。-可以評(píng)估EGFP的表達(dá)水平和純度。3.**熒光光譜分析**：-使用熒光光譜儀測(cè)量EGFP的激發(fā)和發(fā)射光譜。-評(píng)估熒光強(qiáng)度和比較大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)，以確定其熒光特性。4.**流式細(xì)胞儀分析**：-如果EGFP融合蛋白表達(dá)在細(xì)胞中，可以使用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞群體的熒光強(qiáng)度。-這有助于評(píng)估EGFP的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)分布。5.**熒光顯微鏡觀察**：-在熒光顯微鏡下觀察EGFP的亞細(xì)胞定位和表達(dá)模式。-通過(guò)時(shí)間序列成像，可以評(píng)估EGFP在活細(xì)胞中的動(dòng)態(tài)變化和穩(wěn)定性。6.**熱穩(wěn)定性分析**：-通過(guò)逐漸升高溫度并測(cè)量熒光強(qiáng)度的變化，可以評(píng)估EGFP的熱穩(wěn)定性。-熱穩(wěn)定性差的EGFP可能會(huì)在高溫下迅速失去活性。7.**光穩(wěn)定性測(cè)試（光漂白實(shí)驗(yàn)）**：-通過(guò)持續(xù)光照并監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度的下降（光漂白），可以評(píng)估EGFP的光穩(wěn)定性。UBE2L3作為泛素化途徑中的關(guān)鍵酶，其在蛋白質(zhì)降解、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用。DL50 plus

去泛素化酶可以去除泛素化標(biāo)記，這一步驟是泛素化過(guò)程的逆轉(zhuǎn)過(guò)程，它允許細(xì)胞對(duì)泛素化事件進(jìn)行精細(xì)調(diào)控。Recombinant Human CD79B(His-Avi Tag)

SpCas9蛋白（來(lái)自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白）在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶，能夠精確地切割目標(biāo)DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個(gè)關(guān)鍵步驟和作用：1.**識(shí)別和結(jié)合**：SpCas9蛋白與一個(gè)單導(dǎo)向RNA（sgRNA）結(jié)合，形成RNP復(fù)合物。這個(gè)復(fù)合物能夠識(shí)別并結(jié)合到基因組中與sgRNA互補(bǔ)的特定DNA序列。2.**PAM序列識(shí)別**：SpCas9需要一個(gè)稱(chēng)為原間隔子相鄰基序（PAM）的特定序列作為識(shí)別目標(biāo)DNA的先決條件。對(duì)于SpCas9，這個(gè)PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**：一旦RNP復(fù)合物與目標(biāo)DNA結(jié)合，SpCas9就會(huì)在PAM序列的3個(gè)堿基對(duì)的上游位置切割DNA雙鏈，產(chǎn)生一個(gè)雙鏈斷裂（DSB）。4.**引發(fā)DNA修復(fù)**：DNA雙鏈斷裂觸發(fā)細(xì)胞的DNA修復(fù)機(jī)制，包括同源定向修復(fù)（HDR）和非同源末端連接（NHEJ）。研究人員可以利用這些修復(fù)機(jī)制來(lái)插入、刪除或替換特定的DNA序列。5.**基因修改**：通過(guò)HDR，可以在斷裂的DNA兩端引入特定的DNA模板，從而實(shí)現(xiàn)精確的基因編輯。而NHEJ通常會(huì)導(dǎo)致小的插入或缺失（indel），這可以用來(lái)產(chǎn)生基因的敲除或敲入。6.**提高編輯效率**：為了提高SpCas9的編輯效率，研究人員可能會(huì)使用優(yōu)化的sgRNA設(shè)計(jì)、蛋白質(zhì)工程或嵌合融合蛋白等策略。