Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye):擴增的得力助手在現代分子生物學研究中,聚合酶鏈式反應(PCR)技術是不可或缺的工具,廣泛應用于基因克隆、基因表達分析、遺傳病診斷、病原體檢測等諸多領域。而一款PCR反應體系則是實驗成功的關鍵。Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye)憑借其獨特的配方和性能,成為了眾多科研工作者的主要。一、熱啟動機制:開啟擴增之門Hot-Start技術是該Master Mix的亮點之一。在常規PCR反應中,由于Taq酶在室溫下就具有活性,容易導致引物非特異性結合和延伸,從而產生非特異性擴增產物,影響實驗結果的準確性和重復性。而Hot-Start Taq Master Mix通過特殊的化學修飾或抗體封閉技術,在反應初期將Taq酶的活性暫時抑制,只有當反應體系升溫至一定溫度時,修飾或抗體才會被破壞,Taq酶活性得以釋放。這一機制有效避免了低溫下的非特異性擴增,顯著提高了PCR反應的特異性和準確性,尤其適用于復雜模板、低豐度靶基因以及對特異性要求極高的實驗場景。Phusion Master Mix對各種類型的DNA模板(如基因組DNA、質粒DNA和cDNA)均表現出良好的兼容性。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag
一、主要特點:免提取與高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專為血液樣本設計的高效PCR預混液,能夠直接從全血或干血斑中擴增DNA,無需進行繁瑣的DNA提取和純化步驟。這種預混液含有高保真DNA聚合酶(如HemoTaq?或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase),這些酶經過優化,能夠耐受血液中的各種抑制劑,包括抗凝劑(如EDTA、肝素、檸檬酸鈉)和濾紙中的化學物質。此外,該預混液還具備的模板兼容性,能夠從多種抗凝劑保存的血液樣本中直接擴增DNA,適用于人類、小鼠等哺乳動物的全血樣本。二、性能:高保真性與長片段擴增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的優勢之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶,接近Pfu DNA聚合酶,能夠確保擴增產物的準確性。這對于需要高精度的基因克隆和測序實驗尤為重要。此外,該預混液能夠擴增長達5kb甚至更長的DNA片段,適用于多種復雜的基因組分析。例如,它可以輕松擴增人類基因組中的長片段,如IL-6基因的4882bp片段。Recombinant Human R spondin 3/RSPO3 Protein,His TagUBE2L3在調節NF-κB信號通路中的作用可能對免疫反應和炎癥過程至關重要。
高靈敏度與特異性該試劑采用熱啟動Taq DNA聚合酶,結合抗體封閉技術,有效避免了低溫條件下的非特異性擴增,提高了反應的特異性和靈敏度。探針法qPCR通過熒光探針與目標基因的特異性結合,避免了非特異性產物的干擾,檢測靈敏度和特異性高于傳統的SYBR Green方法。低濃度ROX校正染料試劑中含有低濃度ROX作為被動參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號的差異,減少因移液誤差或樣品蒸發等因素引起的熒光波動,確保實驗結果的穩定性和重復性。UDG防污染系統內置UDG(Uracil-DNA Glycosylase)防污染系統,通過降解含有尿嘧啶的PCR產物,有效防止了實驗室中殘留的PCR產物對實驗結果的干擾,避免假陽性結果的出現??焖贁U增與多重檢測優化的反應體系支持快速擴增程序,可在短時間內完成高靈敏度檢測,同時適用于多重PCR檢測,可在單個反應孔中同時檢測多個基因。適用性該試劑適用于多種樣本類型,包括cDNA、基因組DNA等,尤其適合低豐度基因的定量檢測,如低表達的mRNA、lncRNA、小RNA等。
產品特點高靈敏度與特異性SYBRGreen是一種熒光染料,能夠特異性地結合到雙鏈DNA的小溝區域。在qPCR過程中,隨著DNA鏈的延伸,SYBRGreen的熒光信號不斷增強,從而實現對目標基因的實時定量。這種染料的結合特異性極高,確保了實驗結果的準確性。即使在低濃度的模板條件下,也能檢測到目標基因的存在,靈敏度可達單拷貝水平。2×預混體系,操作簡便該產品采用2×預混體系,預先將Taq酶、dNTPs、MgCl?等關鍵組分混合均勻,實驗人員需加入引物和模板即可進行反應。這種預混體系簡化了實驗操作步驟,減少了人為誤差,同時保證了反應體系的均一性和穩定性。無論是初學者還是經驗豐富的研究人員,都能輕松上手,快速開展實驗。低ROX參比染料,減少背景干擾ROX染料作為qPCR反應中的參比染料,用于校正孔間熒光信號的差異。然而,過高的ROX濃度可能會引入背景熒光,影響實驗結果的準確性。SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX)采用了低濃度的ROX染料,有效降低了背景干擾,提高了熒光信號的信噪比,使得定量結果更加精確可靠。Pfu DNA Polymerase的突變體研究:通過研究Pfu DNA Polymerase的突變體,可進一步優化其性能和應用范圍。
在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預混液結合了熱啟動技術和熒光染料,為效率、準確的基因擴增提供了強大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優化的反應緩沖液、dNTPs、增強劑以及熒光染料。其優點在于熱啟動技術的應用。通過在常溫下抑制Taq酶活性,該預混液有效避免了非特異性擴增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴增,以及對特異性要求較高的實驗場景。熒光染料的加入是該預混液的另一大亮點。這種染料在PCR過程中能夠實時監測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。這種“即用型”預混液不僅節省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的污染風險,尤其適合高通量的基因檢測和定量分析。此外,該預混液的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應,減少了手動配制反應體系的步驟和可能出現的誤差。去泛素化酶可以去除泛素化標記,這一步驟是泛素化過程的逆轉過程,它允許細胞對泛素化事件進行精細調控。Recombinant Biotinylated Human ENPP-1 Protein,His-Avi Tag
通過測序或基于PCR的方法(如T7E1酶切和測序)來驗證gRNA的編輯效率,篩選出效率高的gRNA序列 。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag
在分子生物學研究中,RNA的完整性和純度是影響實驗結果的重要因素。5×RNALoadingBuffer作為一種專為RNA非變性凝膠電泳設計的上樣緩沖液,憑借其獨特配方和性能,為RNA分析提供了可靠的工具。產品特點高效沉降與指示功能5×RNALoadingBuffer的主要成分包括甘油、EDTA、溴酚藍和二甲苯青。甘油的高密度特性能夠使RNA樣品在凝膠電泳中順利沉入加樣孔,而溴酚藍和二甲苯青則作為指示劑,幫助實時監測電泳進程。無RNase污染該緩沖液經過DEPC(焦碳酸二乙酯)處理,確保無RNase污染,從而有效保護RNA樣品免受降解,保證實驗結果的可靠性。優化的配方5×RNALoadingBuffer含有5mMEDTA,能夠螯合二價金屬離子,進一步防止RNA在電泳過程中被降解。操作簡便使用時只需將RNA樣品與1/4體積的5×RNALoadingBuffer混合,即可直接上樣電泳。這種簡便的操作流程提高了實驗效率。適用性該緩沖液適用于多種類型的RNA樣品,包括小分子RNA和長鏈RNA,且在非變性條件下能夠保持RNA的天然結構。穩定的保存條件5×RNALoadingBuffer在-20℃條件下可保存兩年,室溫運輸也不會影響其性能,這為實驗室的長期使用提供了便利。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag