外泌體是直徑為30-150nm的小細胞外囊泡。在生理和病理條件下，幾乎所有類型的細胞都可以釋放外泌體，在細胞通訊和表觀遺傳調控中發揮重要作用。外泌體天然存在于體液中，包括血液，唾液，尿液和腦脊液等，內部含有其來源細胞的核酸，蛋白等物質，因此基于外泌體的疾病診斷和治著方法得到了深入的研究。但是如何拿到純凈的外泌體一直是外泌體研究所面臨的難題之一，因此研究人員也開發了許多外泌體分離的方法，來一起看一下吧。差速離心法：離心力從300×g到100,000×g的下進行多次循環離心，較后收集外泌體顆粒。密度梯度離心法：等密度梯度超速離心法是通過從下到上逐步降低密度分層。動區梯度超速離心法由兩個梯度介質部分組成，樣品根據密度/質量/大小被依次分離。外泌體的定量檢測和分析可作為疾病診斷和治著中的新型指標。合肥血液外泌體分離制造商

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體頭次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。成都外泌體分離費用分離樣品前的處理對較終外泌體分離的效果有較大影響。

差速離心法分離外泌體的實驗原理：與等密度和梯度離心相反，差速離心從離心管內顆粒的均勻初始分布開始。在開始一輪離心過程中，位于管底部附近的一部分目標小顆粒不可避免地與較大顆粒共同沉淀。這種共沉淀導致較小顆粒的產量降低。然而，選擇大顆粒，起初位于管半月板附近，在開始一輪離心過程中可能沒有足夠的時間到達管底，從而污染較后一個離心步驟產生的小顆粒顆粒。顯然，交叉污染的程度取決于不同粒子群的相對沉降速度和離心條件。在被分離的粒子的沉降速度之間存在顯著（數量級）差異的情況下，可以有效地優化差速離心協議以獲得目標粒子群的高產量和足夠純度。此外，當不同顆粒部分之間的沉降速率只存在微小差異時，優化過程不太成功。在這些情況下，取決于離心條件。

分離外泌體的方法之免疫親和相互作用：免疫親和法是利用外泌體表面蛋白（抗原）與其靶抗體或分離配體分子之間的免疫親和相互作用原理分離純外泌體的理想方法。它有助于根據其表面標志物分離特定類型的外泌體。基于微孔板的酶聯免疫吸附測定（ELISA）是免疫親和分離試劑盒的一個例子，用于根據外泌體表面標志物分離外泌體。Tetraspanin蛋白是這種分離方法的決定因素。抗CD9、抗CD63和抗CD81是免疫親和外泌體分離中使用的抗體的常見示例。免疫親和法可用于從結腸病細胞中分離外泌體，其效率高于超速離心和密度梯度分離。另外還有一種外泌體分離方法，該方法采用抗體包被的基于磁性顆粒的技術來分離外泌體。外泌體的純化可以通過單顆粒色譜等技術實現。

外泌體衍生物miRNA的重要應用：外泌體保護miRNA免于降解，使它們比游離miRNA更穩定，并能被特定受體細胞有效整合。因此，在外泌體攜帶的貨物中，miRNA可以提供有關它們來源的細胞類型、靶標和細胞狀態的身份信息。越來越多的證據表明，疙瘩細胞來源的外泌體已成為通過傳遞病miRNA促進疙瘩細胞增殖、侵襲、血管生成、遠處轉移和疙瘩微環境重塑的主要候選者。血管生成對于惡性疙瘩的生長和轉移至關重要，因為新血管可以提供額外的氧氣和營養物質，還可以清理廢物。比如：病細胞釋放外泌體exo-miR-21、exo-miR-23；外-miR-29；exo-miR-103和exo-miR-210可以促進增殖、血管生成和疙瘩轉移。外泌體不是干細胞，是干細胞較精華的部分。成都外泌體分離費用

外泌體通過調節免疫系統和疙瘩微環境，在疙瘩免疫治著中的作用日益受到關注。合肥血液外泌體分離制造商

外泌體分離方法之尺寸排阻色譜分離法：尺寸排阻色譜(SEC)用于根據尺寸而非分子量分離大分子。該技術應用了一種填充有多孔聚合物珠子的柱子，該珠子含有多個孔和隧道。分子根據它們的直徑穿過珠子。小半徑分子通過色譜柱的孔遷移需要更長的時間，而大分子從色譜柱中洗脫得較早。尺寸排阻色譜可以精確分離大分子和小分子。此外，該方法可以應用不同的洗脫溶液。與離心機離心方法相比，色譜分離具有較多的優勢，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，避免了因剪切力所造成的囊泡結構改變。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中存在的外泌體的技術。此外，SEC方法與超濾相結合已用于分離和分析尿源性外泌體。此外，流場-流分餾結合紫外分析儀和光散射檢測器已被應用于分析外泌體的大小和純度。流場-流分餾結合拋物線和交叉流來分離外泌體。獲得的外泌體已通過電子顯微鏡和質譜檢測。合肥血液外泌體分離制造商

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