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湖北瓊脂滅菌 培養基制備器

來源: 發布時間:2024-08-04

三角培養瓶是細胞培養中的常用耗材,也可用于培養基的配制、混合及儲存。利用三角培養瓶制備培養基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養瓶:若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角培養瓶,很多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。制備培養基的操作要點:固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。湖北瓊脂滅菌 培養基制備器

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微生物檢驗培養基制備的要點:培養基溶化,將中海培養基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養基中不含瓊脂,則不需要對培養基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養基完全溶解后再加入適量的水攪拌均勻。如準備的北京中海培養基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現焦化現象,則制備好的培養基將無法使用,必須重新配制中海生物培養基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養基,因為銅或鐵容器可能會導致容器內培養基中銅、鐵超標,影響實驗結果,其中培養基中銅含量大于0.3毫克每升,細菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升,防止細菌產生有毒的。容易發生反應和沉淀的藥物應單獨溶解,然后加入培養基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。自動培養基制備器廠家分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養基的徹底滅菌。

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背景技術:培養基是供微生物、植物、動物組織和細菌生長和維持生長用的人工配置的養料,完全滅菌后用于單種微生物培養和鑒定,一般都是在無菌狀態下儲存,定量使用的,屬于一種高新產業。傳統的制備培養基的過程先將培養基粉末進行人工配置,攪勻,然后再裝到錐形瓶里邊在蒸汽滅菌器里邊滅菌再使用,這需要耗費大量的人力物力,而且效率不高。目前,國外進口的培養基制備器,可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率,而且節省了人力物力,但是國外的的進口設備價格比較昂貴,因此造成了生產成本的高居不下,在用戶的使用范圍上造成了一定的局限性。目前國內沒有公司生產該的培養基制備器,因此,完成培養基配置、滅菌一體化顯得尤為重要。

培養基的性能測試:外觀控制:制備好的培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。污染控制:從每批制備好的培養基中選取部分進行污染測試(空白試驗),確定無微生物生長方可使用。同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,很終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。培養基制備器全自動控制程序,確保內部溫度均一。

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在制備培養基時,通常要考慮以下因素:(1)pH值多數細胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細胞株之間細胞生長*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細胞系以pH=7.4~7.7,轉化細胞以pH=7.0~7.4更合適。據報道,上皮細胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍色,pH=7.8呈紫色。由于對顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標準樣,放在與制備培養基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統由于毒性小、成本低、對培養物有營養作用,因此比其他緩沖系統用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數培養細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養基,可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。制備培養基的操作要點:固體培養基在實際中用得十分普遍。寧夏培養基制備器供應商

培養基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內部迅速冷卻。湖北瓊脂滅菌 培養基制備器

微生物檢驗培養基制備的要點:調培養基pH,雖然中海培養基中含有緩沖物質,可以盡量使培養基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。如果沒有,可以使用精確的pH試紙,然后根據需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進行微調。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進行調整至所需的pH值。培養基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質,將pH調至比要求值高0.1~0.2個單位,因為用氫氧化鈉調節時,高壓滅菌后介質的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養基中含有碳酸鈣,則無需調整pH值。湖北瓊脂滅菌 培養基制備器

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