培養基配制:素:為防止培養時期細菌的污染,可在培養基中添加適當素,一般用量與組織細胞培養相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的細胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細胞,但在離體培養過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖,蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質起凝集作用。PHA的細胞數隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細胞均被為止,但PHA濃度過高會引起凝集,一般采用4%濃度為好。培養基制備器一鍵選擇培養皿類型;整合數據庫,預設培養皿尺寸選擇程序。中國香港培養基制備器價格
制作牛肉膏蛋白胨固體培養基:(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過菌的培養皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養基的錐形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養基(約10~20mL)倒入培養皿,左手立即蓋上培養皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。內蒙古培養基制備器品牌培養基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁.
培養基的購置:從培養基自身的質量來看,不同生產廠家的產品,甚至同一廠家不同批號的產品都會存在差異。對培養基的供應企業進行評價后選擇合格的供應商,這是培養基購買過程中重要的步驟。應選擇產品市場信譽度高、有質量保證能力和服務保證能力的企業;企業是否通過了質量管理體系的認證是較為客觀的評價指標。要求生產企業提供:培養基成分名稱及產品編號、批號、使用前的pH、儲藏信息和有效期、性能評價和所用測試菌株、技術數據清單、質控證書以及必要的安全/危害數據等材料。
培養基的滅菌:培養基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌,各種培養基的滅菌時間和壓力,按其成分不同而定。普通培養基采用121℃、滅菌15min,但容器和裝量較大時,應延長至20min。含糖培養基115℃、滅菌30min。含糖、血清、雞蛋等培養基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,連續3d,間歇滅菌。血清或組織液,采用低熱56—58水浴1h,連續5—6d滅菌,一些遇高溫即被破壞的物質如尿素、腹水等,可用細菌過濾器,過濾除菌。高壓滅菌應嚴格按照操作規程執行,必須逐漸加熱,徹底排除滅菌器內的空氣,再逐漸升壓保持預定的壓力和時間,達到全部殺滅微生物。以上的滅菌時間和溫度要經過驗證確認,如不同類型培養基混合一起滅菌時宜采用115℃、滅菌30min為好。培養基制備器負載的壓力,有效地避免了培養基過溫失效和培養基中氣泡的產生。
固體斜面培養基配制步驟:1、培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養基的制備記錄:每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。3、培養基成分的稱取:培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方面軍做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。培養基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁!遼寧培養基制備器廠家
高溫下長時間停留會導致瓊脂過度凝固、糖類焦化或蛋白質變性。中國香港培養基制備器價格
配制培養基的原則:調節氧化還原電位(Eh)各種微生物對培養基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長的Eh值一般為+0.3~+0.4V,厭氧微生物只能在+0.1V以下生長,因此,培養好氧微生物必須保證氧的供應,可在培養基中加入氧化劑提高Eh值。調節滲透壓多數微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養基中營養物質的濃度過大,會使滲透壓過高,使細胞發生質壁分離而抑制微生物生長。低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養基時要掌握營養物質的濃度。常在培養基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。原料來源的選擇力求節約:配制培養基還應遵循力求節約的原則,盡量選用價格便宜、來源方便的原料。特別是在工業發酵中,培養基用量大,更應注意利用低成本的原料,降低產品成本。中國香港培養基制備器價格