培養基的滅菌:一般培養基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基制備方法中,如無特殊規定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20%或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應以無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50°C左右的培養基中。瓊脂斜面培養基應在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時,擺置成適當斜面,待其自然凝固。培養基制備器解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)!河南進口培養基制備器
MS培養基的特點:MS培養基普遍被使用,它的無機鹽濃度較高,十分有利于組織生長所需的礦質營養和加速愈傷組織的生長。因為配方中的離子濃度高,在配制、貯存、消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養基可以用來對愈傷組織可以進行誘導,或者用來培養胚、莖段、莖尖及花藥。在進行細胞懸浮培養時,它的液體培養基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養基中,有比較適當比例和數量的無機養分,能夠滿足植物細胞在營養上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分不需要再被添加。MS培養基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。河南進口培養基制備器需具備±1°C以內的精確控溫,避免溫度波動影響滅菌效果或成分穩定性。
培養基的滅菌:一般培養基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基制備方法中,如無特殊規定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20%如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應從無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50℃左右的培養基中。瓊脂斜面培養基應在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時,擺置成適當斜面、待其自然凝固。
培養基制備基本方法:培養基成分的稱取,培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,很好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。培養基的制備記錄,每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號。很終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。選購時需結合樣本量、成分敏感性及預算,優先選擇控溫精確、升/降溫速度快且具備無菌保護設計的設備。
培養基質量測試:(1)澄清度:水是細胞培養基的溶劑。細胞培養基中的營養成分只有完全溶解于水才能被細胞吸收攝取,細胞才能生長增殖,因此細胞培養基是否溶解以及培養液是否透明澄清直接影響培養基使用。該項目是通過對水溶解后的細胞培養基的澄清度檢查,判斷細胞培養基的澄清度。按中國藥典2005年版二部附錄ⅨB進行。(2)pH值:哺乳類動物細胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導致細胞死亡。pH值的測定也可以檢查細胞培養基的批間差。清大天一標準規定取規定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細胞培養基溶液pH值相近的兩點標準緩沖液校準后的酸度計進行測定。按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進行;加入規定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進行。快速升溫至目標溫度(如121°C)可確保徹底殺滅微生物(包括耐熱芽孢),避免因升溫慢導致滅菌不徹底。河南進口培養基制備器
程序化滅菌曲線優化能量利用,減少資源浪費。 整合攪拌系統確保瓊脂等膠體物質均勻分布。河南進口培養基制備器
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時,要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時左手食指與姆指稍稍緊握,就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后,應迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應緊貼內壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內,上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札,準備滅菌。河南進口培養基制備器