培養基的制備原則和要求：培養基是根據各類微生物生長繁殖的需要，用人工方法把多種物質混合而成的營養物。一般用來分離、培養菌類。常用的培養基有基礎培養基、增菌培養基、選擇培養基、鑒別培養基和厭氧培養基。在制備培養基時，應掌握如下原則和要求：(一)培養基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養物質。所用的化學藥品必須純凈，稱取的份量務必準確。(二)培養基的酸堿度應符合細菌生長要求。按各種培養基要求準確測定調節pH值。多數細菌生長的適宜pH值為7.2～7.6，呈弱堿性。**電加熱**（帶溫控的磁力攪拌器）：建議選擇功率可調、加熱均勻的型號。福建自動培養基制備器

實驗室在制作培養基時候的經驗總結：1、培養基成份稱量：培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，較好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側，每稱完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。2、培養基成份的混合與溶化：培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長。較好使用不銹鋼加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置于高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。河南瓊脂滅菌 培養基制備器**內置冷卻系統**：部分培養基制備器配備水循環冷卻或風扇冷卻功能。

培養基的滅菌：培養基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌，各種培養基的滅菌時間和壓力，按其成分不同而定。普通培養基采用121℃、滅菌15min，但容器和裝量較大時，應延長至20min。含糖培養基115℃、滅菌30min。含糖、血清、雞蛋等培養基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，連續3d，間歇滅菌。血清或組織液，采用低熱56—58水浴1h，連續5—6d滅菌，一些遇高溫即被破壞的物質如尿素、腹水等，可用細菌過濾器，過濾除菌。高壓滅菌應嚴格按照操作規程執行，必須逐漸加熱，徹底排除滅菌器內的空氣，再逐漸升壓保持預定的壓力和時間，達到全部殺滅微生物。以上的滅菌時間和溫度要經過驗證確認，如不同類型培養基混合一起滅菌時宜采用115℃、滅菌30min為好。

培養基的實驗室制備：1.水：除特定要求,實驗室用水的電導率在25℃下應不高于25uS/cm(相當于電阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染應不超過103CFU/mL，較好低于102CFU/mL。應根GB/T5750.12或其他有效方法,定期檢驗微生物的污染。2.稱量和復水：稱量所需量的脫水培養基(注意防止吸入粉末，尤其是含有有害物質的培養基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培養基結塊)后再加水至所需的量。3.溶解和分裝：脫水培養基加水后適當加熱,并不攪拌使其快速溶解，必要時，重新溶解。含瓊脂的培養基在加熱溶解前應浸泡幾分鐘。頻繁報錯建議導出日志進行專業診斷。

分裝：配制好的培養基根據不同的用途分裝在三角瓶、試管等容器中，分裝試管，如果試管量很大，可用自動分液器。如果試管量少，可用漏斗分裝。分裝量不超過容器容積的三分之二。三角瓶以不超過容積的二分之一為宜；瓊脂斜面以不超過試管長度的五分之一為宜，滅菌后，擺成的斜面為培養基的三分之一、底層為三分之二的量為宜；半固體瓊脂分裝量為試管長度的的三分之一；用來接種或保菌的高層瓊脂，分裝量為試管長度的四分之一或三分之一，用來接種厭氧菌的要達到三分之二；瓊脂平板，內徑90mm的以13ml~15ml為宜，內徑70mm的平板為8ml~10ml，制成的瓊脂平板。參數設置丟失需更換備用電池或存儲器。黑龍江Systec培養基制備器

高溫下長時間停留會導致瓊脂過度凝固、糖類焦化或蛋白質變性。福建自動培養基制備器

培養基制備技術：一、玻璃器皿的清洗：在制備培養基的過程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況，經過一定的處理，洗刷干凈。有的還要進行包裝，經過滅菌等準備就緒后，才能使用。1、新購的玻璃器皿：除去包裝沾染的污垢后，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈，再浸泡于１～２％的工業鹽酸中數小時，使游離的堿性物質除去，再以流水沖凈。對容量較大的器皿，如大燒瓶、量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸，數分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用。2、用過的玻璃器皿：凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時沖洗，吸取過化學試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經過適當消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。福建自動培養基制備器