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國產超微量分光光度計紫外檢測

來源: 發布時間:2023-10-07

超微量分光光度計檢測蛋白A280:
蛋白和核酸不一樣,具有很強的多樣性。Protein A280功能應用于檢測那些含有Trp、Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm吸光度明顯。Protein A280功能不需要構建標準曲線,而是檢測吸光度后,直接計算蛋白濃度。
Protein A280顯示紫外吸收光譜,檢測280nm處的吸光度后計算濃度(mg/ml)。和核酸檢測一樣,Protein A280記錄顯示的是10mm光程下的數據。
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Micro Drop在基座模式下可以較高檢測400mg/ml的BSA而不用稀釋。國產超微量分光光度計紫外檢測

Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein Lowry檢測方式:
Lowry法是蛋白與硫酸銅在堿性環境下反應形成銅-蛋白復合物。Folin-Ciocalteu試劑可以有效的還原銅復合物,產生與蛋白量成比例的藍色產物。檢測該藍色產物在650nm處的吸光值,并在405nm處做基線校正,計算得出蛋白的濃度。試驗中使用的試劑可以從多個廠家購買。與其他比色法一樣,Lowry法進行蛋白定量檢測前也需要構建一個標準曲線。
推薦使用20μl的蛋白樣品和100μl Lowry試劑來做反應。在Micro Drop上可以檢測的樣品濃度范圍為0.20mg/ml到4mg/ml。
按照試劑盒生產廠家的說明來準備標準品和和構建標準曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環境溫度一致。可以從試劑盒生產廠家購買用于構建標準曲線的蛋白標準品(BSA)。
甘肅超微量超微量分光光度計Micro Drop超微量采用新一代的2048線性CCD檢測單元,擁有更高的靈敏度和精確度。

分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質的透射率;
k 為摩爾吸收系數;
L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質的濃度;
物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區,除某些物質對光有吸收外,很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。

Micro Drop細胞檢測功能:
細胞檢測是使用分光光度計檢測光透過細胞懸液的散射光,得出對應吸光值。對于Micro Drop而言,基座檢測和比色皿檢測之間比較大的不同是光程不一樣,光譜圖顯示的是從250nm到700nm范圍內的光譜檢測結果。
樣本均一性:在檢測前要確保樣品的均一性,使用基座檢測前要把樣品混合均一再加到基座上檢測,使用比色皿檢測時可以使用攪拌功能。
檢測范圍:由于采用了比較短的檢測光程,Micro Drop可以檢測比較高濃度的細胞懸液。由于可以顯示較**段的光譜。比較稀的樣品可以在較低的波長下檢測,比如說可以在400nm處檢測。用戶還可以使用比色皿來檢測比較稀的樣品。
檢測基座的消毒:如果需要消毒,請使用消毒液,如可以使用0.5%的次氯酸鈉來清潔基座,以保證基座上沒有生物活性物質殘留。
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能。

分光光度計是一類很重要的分析儀器 ,無論在物理學、化學、生物學、醫學、材料學、環境科學等科學研究領域 ,還是在化工、醫藥、環境檢測、冶金等現***產與管理部門 ,紫外可見分光光度計督有***而重要的應用。分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
由于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量樣本量很小,于是超微量分光光度計應運而生。超微量分光光度計近年來已經替換普通的分光光度計成為分子生物學實驗室的新寵,廣泛應用于生命科學實驗室蛋白質組學和基因組學等領域。
超微量分光光度計已成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
用來測量待測物質對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。北京全光譜波長超微量分光光度計紫外檢測

樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。國產超微量分光光度計紫外檢測

A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內;如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準確,樣品內有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。
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